[发明专利]一种检测胎膜早破的试剂盒及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种检测试剂盒及其制备方法，具体涉及一种检测胎膜早破的试剂盒及其制备方法。

背景技术

医学上所使用的试剂盒为分析或检测某种参数时所必需试剂的成套组合，如疾病诊断试剂盒、核酸提取回收试剂盒、细菌鉴定试剂盒等。现有试剂盒大多为采用定量的检测方式，相对来说，试剂盒的检测较免疫层析试纸的定性检测方式更为准确。

胎膜破裂（Rupture of Fetal Membrane，简称ROM）在孕期可能随时发生，在临产前发生的胎膜破裂称为胎膜早破（PROM）。足月后（37孕周后）PROM的发生率约为10%，足月前（37孕周前）PROM的发生率为2-3.5%。胎膜早破是引起产科病人产前、产后并发症的主要因素，也是导致胎儿早产和新生儿必须入住重症监护室的主要原因。由于医务人员不得不在延长孕周与宫内及孕妇感染的风险和胎儿肺发育问题之间求平衡，因而对胎膜早破患者的管理成本高、难度大，准确及时诊断孕妇是否发生胎膜早破至关重要。

现有检测胎膜早破的方法中除以往的临床询问病史等方法外，主要以妊娠妇女阴道分泌物中的可溶性细胞间粘附分子-1（简称sICAM-1）为检测指标的检测工具为较新的方法。其中以sICAM-1为检测指标的检测胎膜早破免疫层析试纸对于产科病人及时诊断是否发生胎膜早破起到了较好的效果；所述免疫层析试纸的检测线内包被有羊抗人sICAM-1多克隆抗体工作液，质控线内包被有羊抗鼠IgG工作液，胶体金结合物中含有鼠抗人sICAM-1单克隆抗体。

现有的以sICAM-1为检测指标的检测胎膜早破免疫层析试纸虽然为产科病人提供了便利，但由于其本身仅是一种定性的检测方式，相对于定量检测的方式其在测定结果上存在一定程度的偏差，从而容易造成错判，导致检测结果的灵敏性以及特异性不够理想；尤其是对发生胎膜早破时，胎膜破口小，破口高导致的阴道羊水流量较小的产科病人而言。

发明内容

有鉴于此，本发明提供一种检测胎膜早破的试剂盒，该试剂盒对于胎膜早破的检测结果的灵敏性和特异性有显著的提高，分别可达到99%和98%以上，从而减少误诊的发生率。

为解决以上技术问题，本发明的技术方案是采用一种检测胎膜早破的试剂盒，所述试剂盒包括有多孔板以及以下试剂：

A、磁性微球悬液：所述磁性微球为直径0.5μm-2μm的羟基化磁性微球与N-羟基硫代琥珀酸亚胺、碳二亚胺共同交联所得；悬液中磁性微球的浓度为75-85个/μL；

所述磁性微球悬液中含有质量分数0.8-1.2%的牛血清白蛋白、0.03-0.05%的叠氮钠、0.01-0.03%的吐温-20以及8-10mmol/L的磷酸盐缓冲液；

B、藻红蛋白标记的链霉亲和素和生物素标记的抗体检测液：所述生物素为N-羟基琥珀酸亚胺酯；所述抗体为鼠抗人可溶性细胞间粘附分子-1单克隆抗体；生物素标记的抗体的浓度为1.7-2mg/mL；所述藻红蛋白标记的链霉亲和素的浓度为1-2μg/ml；

C、可溶性细胞间粘附分子-1蛋白标准品以及标准品稀释液：所述标准品稀释液含有质量分数为1.2-1.5%的牛血清白蛋白、0.008-0.012%的吐温-20、0.04-0.05%的叠氮钠以及8-12mmol/L的磷酸盐缓冲液。

优选的，所述A试剂磁性微球为直径1μm-2μm的羟基化磁性微球与N-羟基硫代琥珀酸亚胺、碳二亚胺共同交联所得；悬液中磁性微球的浓度为80个/μL。

优选的，所述A试剂磁性微球悬液中含有质量分数1%的牛血清白蛋白、0.05%的叠氮钠、0.02%的吐温-20以及10mmol/L的磷酸盐缓冲液。

优选的，所述B试剂生物素标记的抗体的浓度为2mg/mL。

优选的，所述标准品稀释液含有质量分数为1.5%的牛血清白蛋白、0.01%的吐温-20、0.05%的叠氮钠以及10mmol/L的磷酸盐缓冲液。

优选的，所述试剂盒还含有试剂D：样本稀释液；所述样本稀释液含有质量分数为1%的牛血清白蛋白、0.05%的叠氮钠以及10mmol/L的磷酸盐缓冲液。

本发明与现有技术相比，其详细说明如下：

本发明主要采用的技术方案为：检测胎膜早破的试剂盒，所述试剂盒包括有多孔板以及以下试剂：

A、磁性微球悬液：所述磁性微球为直径0.5μm-2μm的羟基化磁性微球与N-羟基硫代琥珀酸亚胺、碳二亚胺共同交联所得；悬液中磁性微球的浓度为75-85个/μL。