[发明专利]鉴定大葱细胞质育性的方法及试剂盒无效
申请号: | 201310168011.6 | 申请日: | 2013-05-09 |
公开(公告)号: | CN103243162A | 公开(公告)日: | 2013-08-14 |
发明(设计)人: | 高莉敏;陈运起;霍雨猛;董飞;孔素萍;陈伟 | 申请(专利权)人: | 山东省农业科学院蔬菜研究所 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 250100 *** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 鉴定 大葱 细胞质 方法 试剂盒 | ||
1.一种鉴定大葱细胞质育性的方法,其特征在于包括如下步骤:
(1)提取待鉴定大葱基因组DNA;
(2)采用如下引物扩增大葱基因组DNA:
正向引物:5′TAATGGAGGCGGTCTTCGTG3′
反向引物:5′TAGGCTTTGGTATTTGTTGC3′;
(3)琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物多态性,在自动凝胶成像系统上观察扩增产物的片段长度,根据片段长度判断大葱细胞质育性。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于采用CTAB法提取大葱基因组DNA。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于所述的片段长度通过PCR扩增、琼脂糖凝胶电泳和凝胶成像系统自动成像的方法进行。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于进行群体鉴定:例如将50-100株混合提取总DNA进行简单PCR扩增,若只出现327bp的片段,说明此群体中都是N型细胞质类型,若只出现1412bp的片段,说明此群体中都是S型细胞质类型;若同时出现327bp的片段和1412bp的片段,说明此群体含有两种类型的细胞质,依次缩小群体范围继续鉴定。
5.鉴定大葱细胞质育性的试剂盒,其特征在于包括如下引物:
正向引物:5′TAATGGAGGCGGTCTTCGTG3′
反向引物:5′TAGGCTTTGGTATTTGTTGC3′;
以及DNA提取试剂。
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