[发明专利]一种快速检测黄牛SIRT1基因SNP的RFLP方法

权利要求书

1.一种快速检测黄牛SIRT1基因启动子区SNP的RFLP方法，其特征在于：以黄牛血液基因组DNA为模板，以引物对P为引物，PCR扩增SIRT1基因启动子，再用限制性内切酶SmaI进行酶切PCR扩增产物，对酶切产物进行琼脂糖凝胶电泳检测，根据电泳结果鉴定黄牛SIRT1基因启动子区的单核苷酸多态性。

2.如权利要求1所述的检测黄牛SIRT1基因SNP的RFLP方法，其特征在于，所述的引物对P为：

上游引物F：5′-GTATAGTCCACGGGGTTACAG-3′，

下游引物R：5′-CCAAACTTGTCTTTCAGAGTC-3′。

3.如权利要求1所述的检测黄牛SIRT1基因SNP的RFLP方法，其中所述PCR扩增的反应程序为：94℃预变性5min；94℃变性30s，60℃退火30s，72℃延伸30s，33个循环；72℃延伸10min。

4.如权利要求1所述的检测黄牛SIRT1基因启动子区SNP的RFLP方法，其特征在于，所述的琼脂糖凝胶的质量浓度为3.0%。

5.如权利要求1所述的检测黄牛SIRT1基因启动子区SNP的RFLP方法，其特征在于：所述的SNP位点为C/G单核苷酸多态性，位于SIRT1基因转录起始位点-274位。

6.如权利要求1所述的检测黄牛SIRT1基因启动子区SNP的RFLP方法，其特征在于，SmaI酶切3.0%琼脂糖凝胶电泳检测后，电泳条带表现为：CC基因型表现为273bp，CG基因型表现为273bp、235bp和38bp，GG基因型表现为235bp和38bp。

7.权利要求1-6中任意一项权利要求所述的方法在作为辅助选择黄牛分子育种、从而加快良种选育速度中的应用。