[发明专利]加强了toyB表达的重组淀粉酶产色链霉菌及构建方法与用途

权利要求书

1.一种淀粉酶产色链霉菌的toyB基因，其特征在于：他的序列如SEQ ID NO:1 所示。

2.一种加强了toyB表达的重组淀粉酶产色链霉菌，其特征在于：它表达了生物合成丰加霉素的关键酶-6-丙酮酰基四氢蝶呤合成酶编码基因toyB，具有比淀粉酶产色链霉菌(Streptomyces diastatochromogenes) 1628更高的丰加霉素表达能力。

3.如权利要求2所述的加强了toyB表达的重组淀粉酶产色链霉菌，其特征在于：所述的原始菌为淀粉酶产色链霉菌(Streptomyces diastatochromogenes)1628。

4.如权利要求2所述的加强了toyB表达的重组淀粉酶产色链霉菌，其特征在于：所述的6-丙酮酰基四氢蝶呤合成酶编码基因toyB来自于待重组的原始菌淀粉酶产色链霉菌(Streptomyces diastatochromogenes)。

5.如权利要求2所述的加强了toyB表达的重组淀粉酶产色链霉菌，其特征在于：所述的6-丙酮酰基四氢蝶呤合成酶编码基因toyB整合入原始菌淀粉酶产色链霉菌染色体。

6.一种如权利要求2所述的加强了toyB表达的重组淀粉酶产色链霉菌的构建方法，其特征在于，过程如下：

1)构建表达载体pIB139-toyB； 

2)利用接合转移法将所述的表达载体整合入淀粉酶产色链霉菌染色体，获得所述的工程菌。

7.如权利要求6所述的方法，其特征在于，利用pIB139载体上的启动子permE*启动toyB基因的表达，利用接合转移法将载体pIB139-toyB特异性的整合入淀粉酶产色链霉菌(Streptomyces diastatochromogenes) 1628的染色体，获得了遗传稳定的工程菌。

8.一种利用如权利要求2所述的加强了toyB表达的重组淀粉酶产色链霉菌的用途，其特征在于，将重组菌1628-TOYB进行发酵，与原始菌株相比，重组菌6-丙酮酰基四氢蝶呤合成酶酶活提高至少1.3倍，丰加霉素产量至少提高了23.4%。