[发明专利]桃色顶孢霉S2915及其抗真菌活性蛋白的制备方法有效

专利信息
申请号: 201310172206.8 申请日: 2013-05-10
公开(公告)号: CN103205367A 公开(公告)日: 2013-07-17
发明(设计)人: 陈新华;陈志腾;敖敬群 申请(专利权)人: 国家海洋局第三海洋研究所
主分类号: C12N1/14 分类号: C12N1/14;C12P21/02;C12Q1/18;C07K1/36;C07K1/30;C07K1/18;C12R1/645
代理公司: 厦门南强之路专利事务所(普通合伙) 35200 代理人: 马应森
地址: 361005 福*** 国省代码: 福建;35
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摘要:
搜索关键词: 桃色 顶孢霉 s2915 及其 真菌 活性 蛋白 制备 方法
【权利要求书】:

1.桃色顶孢霉(Acremonium persicinum)S2915,其特征在于所述桃色顶孢霉(Acremonium persicinum)S2915已于2013年01月22日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:M2013040。

2.如权利要求1所述桃色顶孢霉(Acremonium persicinum)S2915,其特征在于其ITS序列为:

1     GGAAGTAAAA GTCGTAACAA GGTCTCCGTT GGTGAACCAG CGGAGGGATC

51    ATTACTGAGT CTAACAAACT CCCAAACCCC TGTGAACATA CCTACTGTTG

101   CTTCGGCGGG ACCGCCCCGG GCGCCTTCGC GGTGCCCCGG AACCAGGCGC

151   CCGCCGGGGA CATCAAACTC TTGATTGTTA TAGTGGCATT CTCTGAGTAA

201   AGCATACAAA TAAGTCAAAA CTTTCAACAA CGGATCTCTT GGCTCTGGCA

251   TCGATGAAGA ACGCAGCGAA ATGCGATAAG TAATGCGAAT TGCAGAATTC

301   AGTGAATCAT CGAATCTTTG AACGCACATT GCGCCCGCTA GTATTCTGGC

351   GGGCATGCCT GTCTGAGCGT CATTTCAACC CTCGCCCCCG GCTTTTGCTG

401   GGAGCGGTGT TGGGGATCGG CCGCCCGTCA CTGGGAGGCC GGCCCCGAAA

451   TAGAGTGGCG ACCACGCCGT GTGCTCCTCT GCGTAGTAGT AAATCACCTC

501   GCAGGCGGAC AGCGGTGCGG CCT。

3.如权利要求1所述桃色顶孢霉(Acremonium persicinum)S2915,其特征在于其抗真菌蛋白经LC-MS/MS鉴定,其部分氨基酸序列如下所示:

KNMITGTSXADCAILIIAGGVGEFEAGISKD。

4.如权利要求1所述桃色顶孢霉(Acremonium persicinum)S2915,其特征在于其培养上清抗菌谱的测定,包括以下步骤:

1)从GPY平板上挑取生长有桃色顶孢霉(Acremonium persicinum)S2915的菌块接种于GPY液体培养基中,于28℃,180r/min条件下,摇瓶培养7d,真空抽滤除去菌体,获得菌株培养上清;

2)将步骤1)获得的菌株培养上清5mL用无菌0.22μm滤膜过滤除菌,贮存于-80℃条件备用;

3)分别接种宛氏拟青霉、尖孢镰刀菌、长柄链格孢、核盘菌、立枯丝核菌、胶孢炭疽菌及绿色木霉等7株霉菌于马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)平板培养基上,静置于28℃培养箱中培养1~2d,待菌丝生长至合适大小,该平板即可作为受试菌平板;

4)在步骤3)得到的受试菌菌丝边缘1.0cm处放置两块纸片,其中一块纸片上加40μL步骤2)过滤除菌的培养上清,另一块纸片上对应地加等量的培养基作为空白对照,受试菌平板置于28℃条件下培养12~24h,观察受试菌菌丝的生长是否受到了菌株培养上清的抑制作用。

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