[发明专利]一种从海参加工废弃物中提取活性物质的方法

权利要求书

1.一种从海参加工废弃物中提取活性物质的方法，其特征在于：

以海参内脏团为原料，经过预处理、酶解、回流提取、醇沉；

醇沉后沉淀脱色、离心、盐沉、透析即得到海参多糖；

醇沉后上清液经过旋转蒸发、萃取脱脂、水饱和正丁醇萃取，水饱和正丁醇萃取所得萃取液经旋转蒸发、大孔吸附树脂色谱提取，即得到精制海参皂甙；

上述水饱和正丁醇萃取后的水溶液经过脱色、灭菌即得到抗氧化活性海参多肽。

2.按权利要求1所述的从海参加工废弃物中提取活性物质的方法，其特征在于：

1）将原料海参内脏团绞碎，加入其1-2倍体积的蒸馏水搅拌均匀，在45-55℃下恒温预热20-30min；预热后加入原料质量0.3%的复合蛋白酶，进行酶解8-10小时，酶解后加入乙醇至酶解液中乙醇浓度达到60-80%，而后于60-70℃回流提取4-5小时，然后再微波功率为850W的条件下，进行微波提取20-30min，静置过夜；

2）步骤1）醇沉回流提取静止过夜后沉淀加水溶解，使其浓度达到5-7%的水溶液，水溶液再经过滤，滤液用1%活性炭于50-60℃脱色1-2小时,脱色后加入乙酸钾至2mol/L，并冷藏过夜（除蛋白）后离心收集沉淀，沉淀经透析,透析后加入乙醇进行反复醇沉，即得到海参多糖；

3）步骤1）醇沉中回流提取的提取液，经旋转蒸发得浸膏A，浸膏A经水溶解，溶解后用乙酸乙酯萃取脱脂，脱脂后的萃取液再经水饱和的正丁醇溶液萃取，正丁醇萃取液经减压蒸馏浓缩得浸膏B，将浸膏B溶于水中，经大孔树脂依次用蒸馏水、乙醇洗脱，收集乙醇洗脱的组份，即得到精制海参总皂甙；

4）将步骤3）正丁醇萃取的水相以及经大孔树脂用蒸馏水洗脱的组份进行合并，合并后的水溶液用活性炭脱色，高温灭菌，即得到抗氧化活性海参多肽。

3.按权利要求2所述的从海参加工废弃物中提取活性物质的方法，其特征在于：所述步骤2）经脱色后加入乙酸钾至2mol/L，并于4℃冷藏过夜（除蛋白）后以3000rpm/min离心10min收集沉淀，沉淀经去离子水洗涤,将沉淀配制成质量百分比为30％的水溶液,而后经48小时透析,向透析后的样品水溶液中加入乙醇作为沉淀剂,使体系中乙醇的浓度为80%,反复醇沉三次，即得到海参多糖。

4.按权利要求2所述的从海参加工废弃物中提取活性物质的方法，其特征在于：所述浸膏B溶于水中经大孔树脂依次用蒸馏水、体积分数为20%的乙醇、体积分数为50%的乙醇、体积分数为70%的乙醇和体积分数为95%的乙醇洗脱洗脱。

5.按权利要求2所述的从海参加工废弃物中提取活性物质的方法，其特征在于：将步骤3）正丁醇萃取的水相以及经大孔树脂用蒸馏水洗脱的组份进行合并，合并后的水溶液用质量体积比为1%的活性炭、50℃下脱色1h，高温灭菌得到抗氧化活性海参多肽。