[发明专利]用于研究生物细胞或细胞培养物的方法和酶标仪

说明书

相关专利申请

本专利申请要求2012年3月14日提交的美国临时申请号为61/610,647和同样在2012年3月14日提交的瑞士专利申请号为00365/12的优先权。这两个建立优先权的申请的全部内容通过明确的参考全文纳入本申请。

技术领域

本发明涉及一种用于在酶标仪中研究生物细胞或细胞培养物的方法。这种方法典型地包括：通过酶标仪的接收装置来接收孔内含有生物细胞的至少一个微孔板；使所述接收装置和含有生物细胞的所述微孔板的孔相对于所述酶标仪的测量装置定位；通过至少一个所述测量装置来检测至少一个积分信号(例如微孔板的一个孔中所有样品的发光)。

另外，所述方法还包括：使所述接收装置和含有生物细胞的所述微孔板的孔相对于所述酶标仪的动作源定位；利用至少一个所述动作源在至少一个所述动作源和微孔板的特定孔内的生物细胞之间引起相互作用从而引起或产生可测信号；检测在所述微孔板的特定孔内的生物细胞内或其上由所述动作源引起或产生的至少一个积分信号(例如微孔板的一个孔中所有样品的荧光或吸光度)。

背景技术

细胞或它们的代谢产物的荧光的测量可以从现有技术中知道。因此，EP 2 253 983 A2公开了一种用于样品的激发荧光的光谱检测的扫描显微镜，所述样品被激光激发，然后被供给到被分成不同波长范围的散射光栅和多阳极光电倍增管。文件ITMI 912510 A1公开了一种所谓的酶标仪，其中微孔板的孔内的样品被偏振光照射，由此引发的同样的偏振荧光由光电倍增管来检测。利用非偏振激发光来操作的酶标仪也长时间已知。

一些文件也是已知的(例如，JP 58 062 542 A或JP 11 037 923 A)，其公开了通过数码相机来获取微孔板的孔的底部上的颗粒或生物细胞的结合图案的图像，所述数码相机包括成像CCD(电荷耦合器件)或CMOS(互补金属氧化物半导体)传感器。

微孔板孔内细胞发光的测量可以从，例如，DE 102 36 029 A1中了解。公开了一种分配器和CCD相机，其中利用所述分配器通过在微孔板孔内的样品上添加液体来引发发光，利用所述CCD相机通过光学系统来给穿过微孔板孔的透明底部的发光拍照。

从WO 2006/031537 A2可以知道一种用于研究微孔板内的生物细胞的方法和装置。所述微孔板在目标区域内被照射，来自所述目标区域的光被引导至阵列检测器，所述阵列检测器将所述目标区域内微孔板孔内的分散目标检测为部分图像，并将所述部分图像合并形成微孔板孔的整个图像。在这种情况下，可以检测细胞微阵列或无序的生物细胞。

设置为计数室的特殊载玻片内的生物细胞的计数已经从利用光学显微镜计数血细胞的领域知道很长时间了。不同制造商的自动细胞计数系统或“细胞计数器”也是已知的。这些细胞计数器的特点尤其在于具有生物细胞的计数室可以被插入到计数系统，所述计数系统自动聚焦计数光学器件，计数所述生物细胞并显示计数结果。

典型地，在研究微孔板内的生物细胞或细胞培养物的实验室中，产生了由光或电引起的发光，所述发光利用光电倍增管或半导体光电倍增管来测量或利用成像相机来成像。为了解释测量结果或图像，通过光学显微镜来研究所述微孔板，并确定所述生物细胞是否还在正常生理状态，或者它们是否具有异常形态或者甚至已经死亡。

在市场上还可以得到一种细胞测量装置(IsoCyte激光扫描细胞仪，分子装置(Molecular Devices)公司，森尼韦尔，加利福尼亚州，美国)，其利用激光束扫描微孔板孔内的生物细胞，同时利用一个或多个光电倍增管来检测由所述激光束产生的荧光或散射信号，确认并计数孔内出现的生物细胞并产生扫描的孔的图像。通过图像处理，每个图像内的单个细胞得以确认，并列出它们的活性。孔内所有细胞的结果可以合并在一起。

发明目的和概述

本发明的目的是提出一种用于研究微孔板内生物细胞或细胞培养物的替代方法和一种用于进行所述方法的合适装置。

根据这里公开的特征的第一方面，该目的通过一种用于研究酶标仪内的生物细胞或细胞培养物的方法来解决。所述方法包括以下步骤：

a)通过酶标仪的接收装置来接收孔内含有生物细胞或细胞培养物的至少一个微孔板；

b)使所述接收装置和含有生物细胞或细胞培养物的所述微孔板的孔相对于所述酶标仪的测量装置定位；和

c)通过至少一个所述测量装置来检测所述微孔板的特定孔内的生物细胞或细胞培养物内或其上的至少一个积分信号。