[发明专利]一种干扰Survivin基因表达的siRNA分子及其应用在审
申请号: | 201310180793.5 | 申请日: | 2013-05-16 |
公开(公告)号: | CN104164434A | 公开(公告)日: | 2014-11-26 |
发明(设计)人: | 王天有;余波;唐锁勤;周晨光;李剑光 | 申请(专利权)人: | 首都儿科研究所;杭州普施康生物科技有限公司;中国人民解放军总医院 |
主分类号: | C12N15/113 | 分类号: | C12N15/113;C12N15/63;C12N15/87;C12N5/10;A61K48/00;A61P35/00 |
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地址: | 100020 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 干扰 survivin 基因 表达 sirna 分子 及其 应用 | ||
1.一种双链siRNA分子,其特征是由下述核苷酸序列的正义链和反义链组成:
正义链5′-CGUCAUCUGGCUCCCAGCC UUCCX-3′,
反义链5′-GGAAGGCUGGGAGCCAGAU GACGX-3′,其中X代表tt、TT或UU,t代表脱氧胸腺嘧啶。
2.一种siRNA表达质粒,其特征在于,所述质粒包含权利要求1所述的双链siRNA分子的脱氧核糖核酸序列。
3.一种Survivin基因沉默试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包含权利要求权利要求1所述的双链siRNA分子,或者包含权利要求2所述的siRNA表达质粒。
4.一种沉默细胞Survivin基因表达的方法,包括以下步骤:
1)将细胞按1×104/孔接种到24孔细胞培养板中,在37℃、5%CO2培养箱细胞培养24小时。
2)用Opti-MEM分别稀释权利要求1所述的siRNA分子和LipofectamineRNAiMAX,将两者混合,室温下孵育10-20分钟。
3)将第2)步所得的混合物加入第1)步培养细胞中,在37℃孵育24-48小时。
5.权利要求1所述的siRNA分子在制备抗肿瘤药物中的应用。
6.如权利要求5所述的应用,其特征在于,所述肿瘤为肝癌、肺癌、宫颈癌、膀胱癌、白血病、皮肤鳞癌、胃癌、结肠癌、多发性骨髓瘤、骨肉瘤、黑色素瘤中的至少一种。
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