[发明专利]一种重组人转化生长因子TGFB3的制备方法无效
| 申请号： | 201310182505.X | 申请日： | 2013-05-17 |
| 公开（公告）号： | CN104163863A | 公开（公告）日： | 2014-11-26 |
| 发明（设计）人： | 董佳里;张宝华 | 申请（专利权）人： | 天津博发生物技术有限公司;成都博发生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C07K14/495 | 分类号： | C07K14/495;C07K1/16;C07K1/14 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 300000 天津市天津开发*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 重组 转化 生长因子 tgfb3 制备 方法 | ||
1.一种重组人转化生长因子TGFB3的制备方法，其特征在于包含：
包涵体的收集和洗涤；
包涵体的溶解；
变性蛋白的纯化；
单体蛋白的复性；
复性蛋白的纯化。
2.根据权利要求1所述的包涵体的收集和洗涤，其特征在于洗涤液包括：
涤液1 50mmol/L Tris-HCl，5mmol/LEDTA，1mol/LNaCl，0.05％TritonX-100，5％ glycerol；
洗涤液2 50mmol/L Tris-HCl，5mmol/L EDTA，0.1mol/LNaCl，0.05％TritonX-100，5％glycerol；
洗涤液3 5mmol/L EDTA，0.1mol/L NaCl，0.1mol/L HAc，4mol Urea；
洗涤液4 5mmol/L EDTA，0.1mol/LNaCl，0.1mol/L HAc组成。
3.根据权利要求1，2所述的洗涤液，其特征在于该洗涤液的使用顺序按照由1-4的顺序依次进行。
4.根据权利要求1所述的包涵体的溶解，其特征在于其溶解液是由50mmol/L K2HPO4，EDTA，1mmoL PMSF，100mmol/L DTr组成。
5.根据权利要求1，4所述的溶解液，其特征在于EDTA的浓度为1mmol/L。
6.根据权利要求1所述的单体蛋白的复性，其特征在于复性液是由NaCl、L-Arg、GSSG、CHAPS、20％(v/v)DMSO组成。
7.根据权利要求1.6所述的复性液，其特征在于L-Arg的浓度为0.5mol/L。
8.根据权利要求1.6所述的复性液，其特征在于GSSG的浓度为30mmol/L。
9.根据权利要求1所述的复性蛋白的纯化，其特征在于所用的纯化柱是Sepharosel Fast Flow柱。
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