[发明专利]131I标记抗VEGFR2嵌合Fab及其应用有效
申请号: | 201310194589.9 | 申请日: | 2013-05-23 |
公开(公告)号: | CN103330952A | 公开(公告)日: | 2013-10-02 |
发明(设计)人: | 冯振卿;黄剑飞;朱进;咸华;咸云;唐小军;唐奇 | 申请(专利权)人: | 南京医科大学;中国人民解放军南京军区军事医学研究所 |
主分类号: | A61K51/10 | 分类号: | A61K51/10;A61P35/00 |
代理公司: | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 | 代理人: | 柏尚春 |
地址: | 210029 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | sup 131 标记 vegfr2 嵌合 fab 及其 应用 | ||
1.一种131I标记抗VEGFR2嵌合Fab,其特征在于,由氯胺-T氧化法制备,具体包括:
1)100 μg FA8H1加200 μL PB中;同时加60 μL Na131I混和均匀,再加100 μL氧化剂氯胺-T,室温下振荡反应1 min;而后向上述溶液中加200 μL偏焦亚硫酸钠,室温振荡反应5 min;最后加入2 mL 0.2%BSA-PBS,结束标记;
2)分离纯化131I- FA8H1:将上述反应液加入PD-10脱盐柱中,待液体全部流入柱内后持续加入0.2%BSA-PBS冲洗柱子;同时收集流出液体,每10滴收集一管,共收集30管;将收集的30管分别各取5 μL置于一新管中,做好相应标记;在全自动γ计数仪上分别读取各管的γ计数;根据结果判断131I-FA8H1的收集峰管,并计算同位素标记的效率;
3)测定放化纯和比活度:取出装有131I-FA8H1的峰管(5 μL/管),分别加750 μL 0.2%BSA-PBS和750 μL 10%的三氯乙酸(TCA)溶液,充分混匀,可见乳白色沉淀;室温离心,3 000 rpm,10 min;负压吸引器吸尽管中液体,依次测定各管沉淀的γ计数;根据公式计算每个峰管的放化纯,
放化纯% = 沉淀γ计数/相应峰管γ计数×100%
选取放化纯高的峰管合并收集,置于铅盒中4℃保存备用;
根据标记率及放射性活度计算131I-FA8H1的比活度。
2.权利要求1所述的131I标记抗VEGFR2嵌合Fab在制备用于治疗肝癌药物中的应用。
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