[发明专利]一种假虎刺酮的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于天然药物化学领域，特别是涉及一种假虎刺酮的制备方法。

背景技术

假虎刺酮（Carissone），CAS号473-10-9， mp.78-79℃，分子式C₁₅H₂₄O₂，分子量236.36，结构式为

。

假虎刺酮来源于夹竹桃科(Apocynaceae) 埃及假虎刺 Carissa edulis Vahl的根。研究表明，假虎刺酮具有抗真菌作用。在1mg/ml剂量琼脂培养42天后，对黑曲霉UA－172－1和烟曲霉ATCC的抑制率分别为60%和100% 

通过文献检索，国内尚未见从埃及假虎刺的根中制备假虎刺酮的方法。

发明内容

本发明的目的是提供一种假虎刺酮的制备方法，工艺简单、提取率高，整个过程具有安全、无毒等优点。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：

（1）取枝花阿克尼茄树叶粉碎，加入超临界萃取釜中，95%-100%乙醇溶液为夹带剂，通入液态CO₂萃取，解析得萃取物；

（2）上述萃取物用甲醇溶解，加少量中性氧化镁拌样，挥干溶剂，干法上氧化镁柱，石油醚-丙酮混合溶剂梯度洗脱，收集洗脱液减压浓缩得粗提物；

（3）上述粗提物采用高速逆流色谱分离，紫外检测器监测，收集目标成分，冷藏结晶，得假虎刺酮。

步骤（1）中所述萃取压力25-35MPa、温度40-55℃， 萃取时间为50-90min，解析压力7.5-9MPa、温度32-40℃。

步骤（1）中所述CO₂流量为2.5-5ml/g生药/min。

步骤（1）中所述夹带剂用量为总萃取溶剂的12-18%。

步骤（2）中所述中性氧化镁粒径为200-300目。

步骤（2）中所述石油醚-丙酮体积比为23-2:3。

步骤（3）中所述高速逆流色谱的溶剂系统为石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水组合，比例为5-7:5-8:6-8:4-7，下相为流动相，上相为固定相。

本发明的积极效果是：

1.采用超临界CO₂萃取，高效无溶剂残留，对环境无污染；

2.采用柱层析纯化，操作简单，处理量大；

3.采用高速逆流色谱分离，分离速度快，样品无损失，溶剂可以循环使用，适合连续制备。

具体实施方式

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明。

实施例1：

枝花阿克尼茄树叶粉碎，取1kg加入超临界萃取釜中，通入液态CO₂，设置萃取压力25MPa、温度40℃，达到上述参数后，调整液态CO₂流量为4ml/g生药/min，95%乙醇溶液为夹带剂，夹带剂用量为总萃取溶剂的15%，动态萃取50min，在压力7.5MPa、温度40℃下解析，所得萃取物加甲醇溶解后，加少量中性氧化镁拌样，挥干溶剂，干法上氧化镁柱，石油醚-丙酮23:3、15:3、5:3、2:3混合溶剂梯度洗脱，收集洗脱液减压浓缩得粗提物。取石油醚、乙酸乙酯、甲醇、水按6:8:7:5混合，混合充分分层后，取上相注满高速逆流色谱柱，同时开转主机850rpm，泵入下相做流动相，待系统平衡后，流速调节为3.5ml/min，同时用固定相溶解粗提物，由进样阀进样，紫外检测器监测，收集目标流分，连续制备，冷藏流分，得结晶物，经HPLC检测，纯度98.2%。

实施例2：

枝花阿克尼茄树叶粉碎，取2kg加入超临界萃取釜中，通入液态CO₂，设置萃取压力35MPa、温度50℃，达到上述参数后，调整液态CO₂流量为5ml/g生药/min，99%乙醇溶液为夹带剂，夹带剂用量为总萃取溶剂的18%，动态萃取70min，在压力9MPa、温度32℃下解析，所得萃取物加甲醇溶解后，加少量中性氧化镁拌样，挥干溶剂，干法上氧化镁柱，石油醚-丙酮21:3、12:3、5:3、2:3混合溶剂梯度洗脱，收集洗脱液减压浓缩得粗提物。取石油醚、乙酸乙酯、甲醇、水按7:5:6:4混合，混合充分分层后，取上相注满高速逆流色谱柱，同时开转主机950rpm，泵入下相做流动相，待系统平衡后，流速调节为3ml/min，同时用固定相溶解粗提物，由进样阀进样，紫外检测器监测，收集目标流分，连续制备，冷藏流分，得结晶物，经HPLC检测，纯度97.1%。

实施例3：

枝花阿克尼茄树叶粉碎，取2kg加入超临界萃取釜中，通入液态CO₂，设置萃取压力30MPa、温度55℃，达到上述参数后，调整液态CO₂流量为2.5ml/g生药/min，100%乙醇溶液为夹带剂，夹带剂用量为总萃取溶剂的12%，动态萃取90min，在压力8MPa、温度35℃下解析，所得萃取物加甲醇溶解后，加少量中性氧化镁拌样，挥干溶剂，干法上氧化镁柱，石油醚-丙酮18:3、9:3、2:3混合溶剂梯度洗脱，收集洗脱液减压浓缩得粗提物。取石油醚、乙酸乙酯、甲醇、水按5:7:8:7混合，混合充分分层后，取上相注满高速逆流色谱柱，同时开转主机900rpm，泵入下相做流动相，待系统平衡后，流速调节为3ml/min，同时用固定相溶解粗提物，由进样阀进样，紫外检测器监测，收集目标流分，连续制备，冷藏流分，得结晶物，经HPLC检测，纯度97.4%。