[发明专利]一种蟹甲草酚的提取纯化方法

说明书

技术领域

本发明属于中药制药领域，涉及一种蟹甲草酚的提取纯化方法。

背景技术

蟹甲草酚（Cacalonol），为浅黄色针晶，mp.207-208.5℃，分子式为C₁₅H₁₄O₃，分子量242.27，结构式为

。

蟹甲草酚是一种倍半萜类化合物，来源于菊科植物库页岛蟹甲草Cacalia auriculata DC.var.kamchatica(Maxim.)Matsumura的地上部分。药理研究表明，蟹甲草酚具有镇静作用。在小鼠戊巴比妥试验中，口服本品50mg/kg，延长睡眠160%(P<0.05)。 

现有技术中，尚未见蟹甲草酚工业化生产工艺的披露。

发明内容

本发明旨在克服上述技术缺陷，提供一种分离效果好、收率高、产品纯度好，适合工业化生产的蟹甲草酚的提取纯化方法。

为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种蟹甲草酚的提取纯化方法，其特征是：以库页岛蟹甲草的地上部分为原料，加入甲醇溶液，置于超声提取设备中超声提取1-3次，提取液浓缩回收甲醇，用乙酸乙酯萃取，萃取3-4次，得有机溶剂层，减压浓缩，得乙酸乙酯萃取物，进行高压硅胶柱层析，用石油醚-丙酮梯度洗脱，收集各洗脱部分，然后进行薄层层析，收集含蟹甲草酚的组分，浓缩成浸膏后用甲醇溶解，经制备液相色谱进行纯化，乙腈-水进行洗脱，浓缩相应组分，结晶即得。

所述甲醇溶液为80-95%的甲醇水溶液。

所述超声提取频率为50KHz，提取2次，每次0.5h。

所述高压硅胶柱的柱压为2.2-3.3MPa，柱内径为150-250mm，层析柱径高比为1:12，硅胶目数为100-200目。

所述制备型液相色谱仪填料为：ODS C18，5μm，250*46mm。

所述乙腈-水的体积比为45：55。

所述流动相流速为10.0-20.0ml/min，检测波长为 210nm。

所述结晶溶剂为二氯甲烷-甲醇（1.5:1）。

本发明的有益效果是：

1、本发明方法通过提取、萃取、柱层析及制备液相分离、结晶等步骤制备蟹甲草酚，耗时短，得率高，操作简单，易于工业化生产；

2、使用特制高压柱层析，上样量大，周期短，分离度好，产品纯度高；

3、本发明为蟹甲草酚的进一步开发利用提供药理原料、理论和实践支持。

本发明内容通过以下的实施例作进一步的阐述，但并不限制本发明的范围。

具体实施方式：

实施例1：

以库页岛蟹甲草的地上部分为原料，取500g，按质量比1:7加入85%的甲醇，进行超声提取，提取频率为50KHz，提取2次，每次0.5h，过滤，滤液减压回收甲醇，加水悬溶于水，用乙酸乙酯（800ml）萃取3次，得乙酸乙酯层，减压浓缩，得乙酸乙酯萃取物，用甲醇溶解湿法上样至填料200目硅胶高压柱，其中高压柱的柱压为2.9MPa，柱内径为150mm，层析柱径高比为1:12，以石油醚-丙酮的混合溶剂，依次按体积比100:5、100:13、100:20洗脱，分段收集各流分，将含蟹甲草酚流分合并，减压回收溶剂，加甲醇溶解，经高效制备液相分离得到蟹甲草酚粗品，制备型液相色谱仪填料为：ODS C18，5μm，250*46mm，流动相：乙腈-水（45:55），流速：15ml/min，检测波长：210nm，将蟹甲草酚粗品用二氯甲烷-甲醇（1.5:1）进一步结晶纯化，得纯度为98.1%的浅黄色结晶。

实施例2：