[发明专利]一种黄牛IGF2基因单核苷酸多态性的检测方法及试剂盒

权利要求书

1.一种黄牛IGF2基因单核苷酸多态性的检测方法，其特征在于，以包含IGF2基因的待测黄牛全基因组DNA为模板，以引物对P为引物，PCR扩增黄牛IGF2基因，用限制性内切酶Sma I消化PCR扩增产物之后，再对酶切后的扩增片段进行琼脂糖凝胶电泳；根据琼脂糖凝胶电泳结果鉴定黄牛IGF2基因内含子8第17位的单核苷酸多态性；

所述的引物对P为：

上游引物：5’-TACTTCAGTGAGTAGCTCCCCGG-3’；

下游引物：5’-AACCCGTTTGATTCCATCTC-3’。

2.如权利要求1所述的黄牛IGF2基因单核苷酸多态性的检测方法，其特征在于，所述的PCR扩增反应程序为：94℃预变性5min；94℃变性50s，55.5℃退火30s，72℃延伸7s，30～35个循环；72℃延伸10min。

3.如权利要求1所述的黄牛IGF2基因单核苷酸多态性的检测方法，其特征在于，所述的琼脂糖凝胶电泳为质量浓度为4%的琼脂糖凝胶电泳。

4.如权利要求1所述的黄牛IGF2基因单核苷酸多态性的检测方法，其特征在于，根据琼脂糖凝胶电泳结果鉴定黄牛IGF2基因内含子8第17位的单核苷酸多态性为：GG基因型表现为383bp和21bp条带；GA基因型表现为404bp、383bp和21条带；AA基因型表现为404bp。

5.黄牛IGF2基因内含子8第17位的单核苷酸多态性在鉴定不同黄牛群体多态性中的应用。

6.黄牛IGF2基因内含子8第17位的单核苷酸多态性作为分子标记在黄牛肉质性能和生长性状的辅助选择中的应用。

7.如权利要求6所述的应用，其特征在于，在辅助选择时，将基因型为GG和GA型的个体淘汰；基因型为AA型的个体留种进行扩繁。

8.一种检测黄牛IGF2基因单核苷酸多态性的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括：

（1）特异引物，所述的特异引物包括:

上游引物：5’-TACTTCAGTGAGTAGCTCCCCGG-3’；

下游引物：5’-AACCCGTTTGATTCCATCTC-3’；

（2）生化试剂，所述生化试剂包括：Taq DNA聚合酶，扩增模板，灭菌超纯水，限制性内切酶Sma I，包含Mg²⁺、dNTPs的2×Buffer，以及包含600bp、500bp、400bp、300bp、200bp和100bp的DNA Marker I。