[发明专利]一种串联质谱非衍生化法检测试剂盒

权利要求书

1.一种串联质谱非衍生化法检测试剂盒，其包含同位素标记氨基酸标准品混合物、同位素标记酰基肉碱标准品混合物、萃取液、流动相，其特征在于所述萃取液由甲醇、水、饱和一元羧酸组成，甲醇∶水∶饱和一元羧酸体积比为1000∶1～50∶0.01～2。

2.如权利要求1所述的串联质谱非衍生化法检测试剂盒，其特征在于所述饱和一元羧酸为甲酸、乙酸、丙酸或丁酸中之一或它们的组合。

3.如权利要求1所述的串联质谱非衍生化法检测试剂盒，其特征在于所述饱和一元羧酸为甲酸。

4.如权利要求1所述的串联质谱非衍生化法检测试剂盒，其特征在于所述流动相为甲醇、水、饱和一元羧酸混合液，其中甲醇∶水∶饱和一元羧酸体积比为1000∶1～50∶0.01～2。

5.如权利要求4所述的串联质谱非衍生化法检测试剂盒，其特征在于所述饱和一元羧酸为甲酸。

6.如权利要求1所述的串联质谱非衍生化法检测试剂盒，其特征在于所述串联质谱非衍生化法检测试剂盒还包含U型底耐热96孔萃取板、V型底96孔检测板、粘性萃取板贴膜和检测板铝箔。

7.如权利要求1所述的串联质谱非衍生化法检测试剂盒，其特征在于所述串联质谱非衍生化法检测试剂盒还包含氨基酸和酰基肉碱新生儿筛查质控品。

8.权利要求1所述串联质谱非衍生化法检测试剂盒在检测样品中氨基酸和酰基肉碱的用途。

9.如权利要求8所述的用途，其特征在于所述样品为体液，所述体液为血液、血浆、尿液或唾液中之一。

10.权利要求1所述串联质谱非衍生化法检测试剂盒的使用方法，包括下列步骤：

a)内标液制备：使用1.0ml的萃取液加入氨基酸内标的冻干粉小瓶中，盖紧瓶盖，震荡，使其中的粉末完全溶解；使用1.0ml的萃取液加入酰基肉碱内标的冻干粉小瓶中，盖紧瓶盖，震荡，使其中的粉末完全溶解；

b)工作液制备：将内标液置于室温20分钟；以每孔100μl萃取液用量，计算当日测定样本和指控所需的萃取液总量；以体积比108:1:1加入萃取液、氨基酸内标液和酰基肉碱内标液，即配成工作液；

c)取样：将质控血片、样本血片在96孔板排序；用3.2mm打孔器顺序将血片打入U型底耐热96孔萃取板中；

d)样本萃取：将100μl含内标的工作液分别加入96孔板的反应孔中，萃取样本；用粘性贴膜密封孔板，在45℃的孵育震荡器中，700rpm震荡45分钟；

e)样本上机检测：揭去密封膜，用移液器每孔移出80μl上清液，顺序置入洁净96孔板，用铝箔密封96孔板，放入质谱自动进样器托盘，供质谱检测，进样20ul，进样速度：0～0.2min为0.12ml/min，0.2～1.2min为0.015ml/min，1.2～1.5min为0.5ml/min。每份样本1.7min；采用串联质谱仪电喷雾阳离子方式，离子源温度120℃，解离温度350℃，喷雾电压3.5KV，氮气650l/h，锥孔气50l/h；多反应监测模式收集数据，每个离子对0.05ms依次循环检测离子对，每份样本采集0.3-1.3min时间段的检测信号，叠加信号强度供定量。