[发明专利]肝损伤新诊断标志物调钙素的ELISA检测试剂盒有效
申请号: | 201310206809.5 | 申请日: | 2013-05-29 |
公开(公告)号: | CN103592438A | 公开(公告)日: | 2014-02-19 |
发明(设计)人: | 李莉;张晶;韦新焕;刘晓慧;郭海清;马丽霞;赵鹏;谢立 | 申请(专利权)人: | 首都医科大学附属北京佑安医院 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68 |
代理公司: | 北京海虹嘉诚知识产权代理有限公司 11129 | 代理人: | 张涛 |
地址: | 100069 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 损伤 诊断 标志 物调钙素 elisa 检测 试剂盒 | ||
1.小鼠杂交瘤细胞系GB118,保藏号为CGMCC No.6909。
2.权利要求1所述的小鼠杂交瘤细胞系GB118产生的抗血清。
3.一种结合调钙素蛋白的单克隆抗体,其特征在于,是由权利要求1所述的杂交瘤细胞系GB118制备而得。
4.一种结合调钙素蛋白的抗体,其重链可变区由权利要求3所述单克隆抗体的重链可变区氨基酸序列所定义,和/或其轻链可变区由权利要求3所述单克隆抗体的轻链可变区的氨基酸序列所定义。
5.一种检测调钙素水平的ELISA试剂盒,包括酶标板,其特征在于:所述酶标板微孔内包被有含权利要求3所述的单克隆抗体的包被液。
6.根据权利要求3所述的ELISA试剂盒,所述包被液中的单克隆抗体的浓度为0.5μg/ml。
7.根据权利要求3所述的ELISA试剂盒,所述ELISA试剂盒还包括抗调钙素蛋白多抗和酶标二抗,所述抗调钙素蛋白多抗是调钙素蛋白免疫新西兰大耳白兔后分离纯化获得的多抗,所述酶标二抗为辣根过氧化物酶标记的羊抗兔二抗。
8.用于非诊断目的检测调钙素水平的双抗夹心ELISA方法,其特征在于,酶联免疫反应中的第一抗体为权利要求3所述的单克隆抗体。
9.根据权利要求6所述的双抗夹心ELISA方法,还包括采用抗调钙素蛋白多抗和酶标二抗,所述抗调钙素蛋白多抗是调钙素蛋白免疫家兔后分离纯化获得的多抗,所述酶标二抗为辣根过氧化物酶标记的羊抗兔二抗;
所述抗调钙素蛋白多抗的工作稀释倍数为1000,所述酶标二抗的工作稀释倍数为5000。
10.根据权利要求9所述的双抗夹心ELISA方法,所述ELISA方法中,在加多抗后反应条件为:37℃90分钟,加入酶标二抗后反应条件为37℃30分钟。
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