[发明专利]合成型转录因子VP64‑linker‑Os03g11370在改良水稻籽粒性状方面的应用有效
申请号: | 201310214040.1 | 申请日: | 2013-05-31 |
公开(公告)号: | CN104211809B | 公开(公告)日: | 2017-02-08 |
发明(设计)人: | 李宏宇;张春雨;刘斌;赵涛;刘军;林辰涛 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院作物科学研究所 |
主分类号: | C07K19/00 | 分类号: | C07K19/00;C12N15/62;C12N15/63;C12N5/10;C12N15/82;A01H5/00 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司11002 | 代理人: | 王朋飞 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 成型 转录 因子 vp64 linker os03g11370 改良 水稻 籽粒 性状 方面 应用 | ||
技术领域
本发明属于遗传工程领域,涉及水稻转录因子Os03g11370基因的应用,具体地,涉及合成型转录因子VP64-linker-Os03g11370在改良水稻籽粒性状方面的应用。
背景技术
水稻(Oryza sativa L.)是我国和全世界重要的粮食作物,世界1/2以上人口以水稻为主食,因此水稻产量性状一直以来倍受科学家们的关注,而水稻籽粒大小则是影响产量的主要因素之一。另外,水稻作为农作物基因功能研究的模式植物,与其相关的遗传学和分子生物学研究一直受到研究者们的重视。水稻籽粒的生长发育是一个有次序的、选择性的基因表达过程,转录因子在其基因表达的精确调控中起到了关键性的作用。
近些年,有关籽粒大小性状的分子遗传调控机制研究,已取得了一定进展,如:研究者们利用QTL定位了一些籽粒大小相关基因,其中GS3编码一个膜蛋白,是籽粒大小和器官大小的负调控因子;张启发等研究发现GS5编码一个调节籽粒大小的丝氨酸羧肽酶,是控制籽粒大小的正调节因子,过表达GS5可使水稻籽粒明显变大;转录因子在调控籽粒大小方面起着非常重要的作用,OsWRKY78可以调节水稻茎的伸长和种子的发育,OsWRKY78突变体可以使茎杆变矮化影响籽粒发育;螺旋-环-螺旋蛋白(bHLH)类转录因子能通过调控外稃和内稃细胞的长度影响谷粒的大小;PGL1碱性螺旋-环-螺旋蛋白(bHLH)异源二聚体作为结合DNA的bHLH的抑制子过表达后可增加籽粒长度和重量。
VP16最早在动物病毒基因中发现,现已被广泛应用到植物中, 主要用于植物基因的转录调控的研究中。转录因子在体内的作用大体上可以分成两种:一种为转录增强子,另一种为转录抑制子。当转录因子和VP16功能域基序融合之后,它就会增强转录因子的功能,从而在转基因植株中出现更明显的表型变化。
发明内容
本发明的目的在于提供水稻转录因子Os03g11370基因的应用。
为了实现本发明目的,本发明提供了一种融合蛋白(VP16)4-linker-Os03g11370,其中,linker由39个柔性氨基酸串联而成;VP16为来自单纯疱疹病毒(Herpes simplex virus)的VP16蛋白;Os03g11370为水稻转录因子Os03g11370。
优选地,所述融合蛋白(VP16)4-linker-Os03g11370为:
(1)SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列组成的蛋白质;
(2)SEQ ID No.1所示的氨基酸序列经取代、缺失或添加一个或几个氨基酸且具有同等功能的由(1)衍生的蛋白质。
本发明还提供了所述融合蛋白(VP16)4-linker-Os03g11370的编码基因,优选地,所述基因为VP64-linker-Os03g11370。
所述基因VP64-linker-Os03g11370的核苷酸序列为:
(1)SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列;
(2)在严格条件下,能够与(1)所示核苷酸序列杂交的核苷酸序列;其中,所述严格条件为65℃,在0.1×SSPE或0.1×SSC、0.1%SDS的溶液中杂交并洗膜。
其中,所述Os03g11370的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示,其氨基酸序列如SEQ ID No.4所示;所述linker(连接子)的核苷酸序列如SEQ IDNo.5所示,其氨基酸序列如SEQ ID No.6所示;所述VP64(4×VP16)的核苷酸序列如SEQ IDNo.7所示,其氨基酸序列如SEQ ID No.8所示,其氨基酸序列中,Asp Ala Leu Asp Asp Phe Asp Leu Asp Met Leu代表VP16序列,Gly Ser为连接VP16的间隔序列。
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