[发明专利]一种分析烟草及烟草制品中有机氯农药残留的GC-MS/MS方法

权利要求书

1.一种分析烟草及烟草制品中有机氯农药残留的GC-MS/MS方法，其特征在于：是将样品经水浸润后，加入乙腈和内标物，然后涡旋提取、盐析分层，之后用氯化钠水溶液与正己烷进行二次盐析和液液萃取，取正己烷上清液，以气相色谱-串联质谱法（GC-MS/MS）进行测定的方法，具体方法如下：

a、内标溶液的配制：配制TPP（三苯基磷酸酯）浓度为20 μg/mL的丙酮溶液；

b、称取样品：称取2.0 g烟草样品于50 mL具塞离心管中，精确到0.1 g； 

c、加水浸润样品：准确加入10 mL水，浸润10 min；

d、振荡萃取：准确加入10 mL乙腈和100 μL内标溶液，在漩涡混合振荡仪上以2000 rpm涡旋1 min；

e、盐析分层：加入盐析试剂包（含4 g无水硫酸镁，1 g氯化钠，1 g柠檬酸钠和0.5 g柠檬酸氢二钠），立即于漩涡混合振荡仪上以2000 rpm振荡2 min，在高速离心机上以5000 rpm离心3 min；

f、液液萃取：取1 mL乙腈提取液于15 mL离心管中，并加入1 mL正己烷和5 mL氯化钠水溶液（20 %，w/w），在漩涡混合振荡器上以2000 rpm的转速振荡2 min，在高速离心机上以5000 rpm离心3 min，取上层正己烷溶液待用；

g、准备标准工作溶液：分别称取0.010 g（精确至0.1 mg）各种农药标准品，置于同一10 mL容量瓶中，用丙酮溶解并定容，然后用正己烷-丙酮（9：1，v/v）稀释并最终配制成具有浓度梯度的各种农药的系列标准工作溶液； 

h、准备基质配标工作溶液：对空白烟草样品按相同的前处理方式处理后，分别取1 mL上层正己烷溶液氮气吹干后，用1 mL不同浓度梯度的农药标准工作溶液进行复溶；

i、GC-MS/MS测定:吸取配制好的不同浓度的基质配标工作溶液，过0.22 μm有机滤膜后，注入GC-MS/MS;

j、农药残留测定结果的计算:以内标法进行农药目标物的定量分析，即以农药和内标TPP的二级选择离子峰面积比对其相应浓度进行回归分析，得到标准曲线；对提取后的样品进行测定，测得检出农药和内标TPP的二级选择离子峰面积比，代入标准曲线，求得样品中有机氯农药的含量。

2.根据权利要求1所述的分析烟草及烟草制品中有机氯农药残留的GC-MS/MS方法，其特征在于：有机氯农药指的是以下27种：艾氏剂、狄氏剂、氯丹（顺）、氯丹（反）、氯酞酸甲酯、二溴氯丙烷、o,p'-DDT、p,p'-DDT、o,p'-DDD、p,p'-DDD、o,p'-DDE、p,p'-DDE、氯硝胺、α-硫丹、β-硫丹、硫丹硫酸酯、异狄氏剂、α-六六六、β-六六六、δ-六六六、林丹、七氯、环氧七氯（顺）、环氧七氯（反）、六氯苯、甲氧滴滴涕、灭蚁灵。

3.根据权利要求1所述的分析烟草及烟草制品中有机氯农药残留的GC-MS/MS方法，其特征在于：具有浓度梯度的各种农药的系列标准工作溶液浓度为：2 ng/mL、5 ng/mL、10 ng/mL、20 ng/mL、50 ng/mL、100 ng/mL、200 ng/mL。

4.根据权利要求1所述的分析烟草及烟草制品中有机氯农药残留的GC-MS/MS方法，其特征在于：

在GC-MS/MS测定时，采用的色谱条件为：色谱柱：TR-Pesticide II弹性石英毛细管色谱柱（30 m×0.25 mm×0.25 μm）；进样口温度：250 ℃；程序升温：初始温度90 ℃，保持5 min后以25 ℃/min升至180 ℃，保持15 min；然后以5 ℃/min升至280 ℃，保持6.5 min；柱后程序：300 ℃，保持5 min；不分流进样，不分流时间1 min；载气：氦气（纯度为99.999%）；恒流模式，流速为1.2 mL/min；进样量：1 μL，总运行时间为55 min；

采用的质谱条件为：EI电离模式，电离能70 eV；灯丝电流：50 μA；离子源温度：250 ℃；传输线温度：280 ℃；Q2碰撞气：氩气（纯度99.999%），碰撞池压力为1.0 mTorr；溶剂延迟5 min；扫描方式 ：多反应监测（MRM）。