[发明专利]一种分析烟草及烟草制品中有机氯农药残留的GC-MS/MS方法

说明书

技术领域

本发明属于烟草及烟草制品中农药残留检测技术领域，主要涉及烟草及烟草制品中的有机氯农药残留的测定技术。

 

背景技术

有机氯类农药作为一种持久性有机污染物（POPs），由于其半衰期长，且具有长期残留性、生物蓄积性和高毒性，因此得到了广泛的关注。

农药残留是指农药施用于农作物之后，残留在环境、农作物和生物体内的微量农药及其代谢物和降解产物等。在烟草的育苗生长和采摘后的储存过程中，不可避免的使用到除草剂、植物生长调节剂、杀虫剂、杀螨剂和杀菌剂等。而同时烟草作为一种吸食品，其安全性要求高，因此，烟草中的农药残留得到了广泛的关注。

鉴于农药残留的危害性和重要性，很多国家和地区提出了对多种农作物中的农药残留限量及质控方法，如日本的一齐法、欧盟的SANCO/10684/2009等。国际烟草科学研究合作中心（CORESTA）于2003年12月提出了烟草中99种农药的指导性残留限量（GRLs， Guidance Residue Levels）,2008年6月进行了修订，现为118种。

对烟草中有机氯类残留分析的检测方法主要有气相色谱（GC-ECD）、气相色谱-质谱联用（GC-MS）等，气相色谱-串联质谱（GC-MS/MS）未单独用于分析有机氯农残。质谱作为检测器提高了方法在定性上的可靠性，二级质谱（MS/MS）相对一级质谱（MS），其抗干扰能力更强，对样品前处理的要求更低。

为适应二级质谱的高选择性和强抗干扰能力，前处理方法中应用最多的就是简单快速的QuEChERS方法。自2003年起，Anastassiades等提出了适用于水果和蔬菜中多残留分析的QuEChERS方法之后，该方法迅速发展并不断改进，并应用到烟草及烟草制品中农药残留的测定。该方法的一般原理是，乙腈萃取后用PSA净化，而后或稀释或溶剂替换，上机检测。

 

发明内容：

本发明的目的旨在进一步简化现有方法并得到更干净的上机溶液，提供一种样品经水浸润后，加入乙腈和内标物，然后涡旋提取、盐析分层，然后用氯化钠水溶液与正己烷进行二次盐析和液液萃取，取正己烷上清液，以气相色谱-串联质谱法（GC-MS/MS）进行测定的方法。该方法能快速、准确检测烟草及烟草制品中有机氯农药残留，测定结果准确、重复性好。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：本发明的烟草及烟草制品中有机氯农药（指的是表1中的27种）残留量的测定方法包括以下步骤：

a、内标溶液的配制：配制TPP（三苯基磷酸酯）浓度为20 μg/mL的丙酮溶液；

b、称取样品：称取2.0 g烟草样品于50 mL具塞离心管中，精确到0.1 g； 

c、加水浸润样品：准确加入10 mL水，浸润10 min；

d、振荡萃取：准确加入10 mL乙腈和100 μL内标溶液，在漩涡混合振荡仪上以2000 rpm涡旋1 min；

e、盐析分层：加入盐析试剂包（含4 g无水硫酸镁，1 g氯化钠，1 g柠檬酸钠和0.5 g柠檬酸氢二钠），立即于漩涡混合振荡仪上以2000 rpm振荡2 min，在高速离心机上以5000 rpm离心3 min；

f、液液萃取：取1 mL乙腈提取液于15 mL离心管中，并加入1 mL正己烷和5 mL氯化钠水溶液（20 %，w/w），在漩涡混合振荡器上以2000 rpm的转速振荡2 min，在高速离心机上以5000 rpm离心3 min，取上层正己烷溶液待用；

g、准备标准工作溶液：分别称取0.010 g（精确至0.1 mg）各种农药标准品（各农药标准品名称见表1），置于同一10 mL容量瓶中，用丙酮溶解并定容，然后用正己烷-丙酮（9：1，v/v）稀释并最终配制成具有浓度梯度的各种农药的标准工作溶液； 

h、准备基质配标工作溶液：对空白烟草样品按相同的前处理方式处理后，分别取1 mL上层正己烷溶液氮气吹干后，用1 mL不同浓度梯度的农药标准工作溶液进行复溶；

i、GC-MS/MS测定:吸取配制好的不同浓度的基质配标工作溶液，过0.22 μm有机滤膜后，注入GC-MS/MS;

j、农药残留测定结果的计算:以内标法进行农药目标物的定量分析，即以农药和内标TPP的二级选择离子峰面积比对其相应浓度进行回归分析，得到标准曲线；对提取后的样品进行测定，测得检出农药和内标TPP的二级选择离子峰面积比，代入标准曲线，求得样品中有机氯农药的含量。