[发明专利]一种还原敏感型聚乙二醇-药物偶联物及其制备方法

权利要求书

1.一种还原敏感型聚乙二醇-药物偶联物，其特征在于，其结构通式如下所示：

其中，n为8～70；x=y，且x为1、2或3；R为细胞毒抗癌药物分子。

2.根据权利要求1所述的还原敏感型聚乙二醇-药物偶联物，其特征在于：所述的细胞毒抗癌药物分子为阿霉素、表阿霉素、紫杉醇、多西紫杉醇、喜树碱、10-羟基喜树碱、长春碱或长春新碱。

3.一种如权利要求1或2所述的还原敏感型聚乙二醇-药物偶联物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

1）含二硫键的二酰肼的合成：

将含二硫键的二元酸、一元醇、甲苯以及对甲苯磺酸加入反应器中，回流反应6～12小时，然后去除溶剂，再向反应器内的剩余物中加入水合肼水溶液，回流反应2～6小时，然后重结晶，即得含二硫键的二酰肼；其中，所加入的含二硫键的二元酸与一元醇的摩尔比为（1:10）～（1:30），含二硫键的二元酸与水合肼水溶液中的水合肼的摩尔比为1:（20～40），一元醇为甲醇或乙醇；

2）含二硫键的二异氰酸酯的合成：

将含二硫键的二酰肼溶于盐酸中，在冰盐水浴冷却下滴加亚硝酸钠水溶液，然后在室温下反应2～8小时，再加入与盐酸等体积的苯，搅拌后分出苯相，苯相干燥；将经过干燥的苯相于60～100℃下回流反应1～4小时，去除溶剂，即得含二硫键的二异氰酸酯；其中，所加入的含二硫键的二酰肼与亚硝酸钠水溶液中的亚硝酸钠的摩尔比为1:（5～15）

3）端异氰酸酯基聚乙二醇的合成：

在氮气保护下，将分子量为400～3000道尔顿的甲氧基聚乙二醇和含二硫键的二异氰酸酯加入无水甲苯中，于60～110℃下反应6～24小时，然后去除溶剂，反应器内的剩余物经纯化，即得端异氰酸酯基聚乙二醇；其中，所加入的甲氧基聚乙二醇和含二硫键的二异氰酸酯的摩尔比为（1:8）～（1:20）；

4）还原敏感型聚乙二醇-药物偶联物的形成：

将端异氰酸酯基聚乙二醇和细胞毒抗癌药物溶于无水有机溶剂中，于40～60℃下反应12～36小时，得反应液；将反应液浓缩至三分之一体积，然后用pH值为7.4的PBS缓冲液稀释至浓缩前的反应液体积，得混合体系；混合体系在作为透析液的pH值为7.4的PBS缓冲液中透析，透析后将留在透析袋内的液体冷冻干燥，得到还原敏感型聚乙二醇-药物偶联物；其中，所加入的端异氰酸酯基聚乙二醇与药物的摩尔比为（1:5）～（1:15），无水有机溶剂为无水二甲亚砜、无水氯仿、无水二氯甲烷或无水丙酮。

4.根据权利要求3所述的还原敏感型聚乙二醇-药物偶联物的制备方法，其特征在于：所述的步骤1）中的含二硫键的二元酸为2,2'-二硫代二乙酸、3,3'-二硫代二丙酸或4,4'-二硫代二丁酸。

5.根据权利要求3所述的还原敏感型聚乙二醇-药物偶联物的制备方法，其特征在于：所述的步骤1）中的含二硫键的二元酸与对甲苯磺酸的摩尔比为1:0.01。

6.根据权利要求3所述的还原敏感型聚乙二醇-药物偶联物的制备方法，其特征在于：所述的步骤1）中的重结晶溶剂是由体积比为（20:80）～（5:95）的水和乙醇混合而成的，水合肼水溶液的质量浓度为50%-85%。

7.根据权利要求3所述的还原敏感型聚乙二醇-药物偶联物的制备方法，其特征在于：所述的步骤2）中盐酸的浓度为0.5～3mol/L，苯相采用无水硫酸钠干燥。

8.根据权利要求3所述的还原敏感型聚乙二醇-药物偶联物的制备方法，其特征在于：所述的步骤3）中的纯化是指，将反应器内的剩余物用二氯甲烷溶解，在-20℃～-10℃的无水乙醚中沉淀，反复重复该溶解-沉淀过程。

9.根据权利要求3所述的还原敏感型聚乙二醇-药物偶联物的制备方法，其特征在于：所述的步骤4）中细胞毒抗癌药物为阿霉素、表阿霉素、紫杉醇、多西紫杉醇、喜树碱、10-羟基喜树碱、长春碱或长春新碱。

10.根据权利要求3所述的还原敏感型聚乙二醇-药物偶联物的制备方法，其特征在于：所述的步骤4）中每升无水有机溶剂中加入5～20克的端异氰酸酯基聚乙二醇，透析是在室温、避光条件下进行的，透析2～4天，每天更换透析液4～8次。