[发明专利]表达鲟鱼卵母细胞成熟相关蛋白的重组巴斯德毕赤酵母有效
申请号: | 201310231647.0 | 申请日: | 2013-06-09 |
公开(公告)号: | CN103333812A | 公开(公告)日: | 2013-10-02 |
发明(设计)人: | 胡红霞;宋超;朱华;董颖;王巍 | 申请(专利权)人: | 北京市水产科学研究所 |
主分类号: | C12N1/19 | 分类号: | C12N1/19;C12N15/81;C12N15/12;C07K14/46;C12R1/84 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅;任凤华 |
地址: | 100068 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 表达 鲟鱼 细胞 成熟 相关 蛋白 重组 巴斯德毕赤 酵母 | ||
1.重组巴斯德毕赤酵母,其特征在于:所述重组巴斯德毕赤酵母是巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)GtHIIβαA1,其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的登记入册编号为CGMCC No.7394。
2.表达鲟鱼卵母细胞成熟相关蛋白的重组巴斯德毕赤酵母的构建方法,包括将鲟鱼卵母细胞成熟相关蛋白基因导入作为宿主菌的巴斯德毕赤酵母中得到表达鲟鱼卵母细胞成熟相关蛋白的重组巴斯德毕赤酵母的步骤;
所述鲟鱼卵母细胞成熟相关蛋白为如下a)或b)或c)的蛋白质:
a)氨基酸序列如SEQ ID No.2第1-221位所示的蛋白质;
b)氨基酸序列如SEQ ID No.2所示的蛋白质;
c)将a)或b)经过取代和/或缺失和/或添加一个或几个氨基酸残基得到的与鲟鱼卵母细胞成熟相关的由a)衍生的蛋白质。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于:所述鲟鱼卵母细胞成熟相关蛋白基因为如下1)-6)中任一所述的DNA分子:
1)编码权利要求1所述蛋白质的DNA分子;
2)其编码序列是SEQ ID No.1的第11-694位核苷酸的DNA分子;
3)其编码序列是SEQ ID No.1的第11-673位核苷酸的DNA分子;
4)核苷酸序列是SEQ ID No.1的DNA分子;
5)在严格条件下与2)、3)或4)限定的DNA分子杂交且编码权利要求1所述蛋白的DNA分子;
6)与2)、3)或4)限定的DNA分子具有90%以上的同源性且编码权利要求1所述蛋白的DNA分子。
4.根据权利要求2或3所述的方法,其特征在于:所述宿主菌为巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)X-33。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于:所述鲟鱼卵母细胞成熟相关蛋白基因通过重组表达载体导入所述宿主菌中,所述重组表达载体是用所述鲟鱼卵母细胞成熟相关蛋白基因替换pPICZαA的Xho I和Not I之间片段得到的表达所述鲟鱼卵母细胞成熟相关蛋白重组表达载体。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于:所述重组巴斯德毕赤酵母是巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)GtHIIβαA1,其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的登记入册编号为CGMCC No.7394。
7.由权利要求2-5中任一所述方法构建的表达鲟鱼卵母细胞成熟相关蛋白的重组巴斯德毕赤酵母。
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