[发明专利]表达鲟鱼卵母细胞成熟相关蛋白的重组巴斯德毕赤酵母

说明书

技术领域

本发明涉及表达鲟鱼卵母细胞成熟相关蛋白的重组巴斯德毕赤酵母。

背景技术

鲟形目鱼类是一类古老的软骨硬鳞鱼类，有活化石之称，在鱼类进化史上具有重要地位。同时还具有重要的经济价值，在全球范围内均处于不同程度的濒危状态，全部被列为《濒危动植物种国际贸易公约》附录II物种。

为了挽救鲟鱼资源以及商业目的，世界各地人工养殖鲟鱼不断兴起。但鲟鱼的人工繁殖存在诸多困难：主要因为鲟鱼性成熟时间晚，繁殖周期长，繁殖间隔时间一般为2-3年；此外天然和养殖环境下都发现有雌鱼性腺发育的不同步现象，由于养殖条件与天然环境相差较大，许多养殖鲟鱼的性腺不能正常发育。

在养殖鲟鱼的人工繁殖实践中，往往需要注射一些催产剂来促使亲鱼产卵。目前，在鱼类养殖中广泛使用的催产剂有三种：脑垂体、绒毛膜促性腺激素和促黄体生成素释放激素类似物（LRH-α）。但这些催产剂都存在各自的不足之处，例如脑垂体虽然有显著的催熟作用，但获取困难，代价高昂；而另外两种催产剂的效果有时并不理想。开发容易制备、成本低的新型催产剂将促进鲟鱼的人工养殖。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种表达鲟鱼卵母细胞成熟相关蛋白的重组巴斯德毕赤酵母及其构建方法。

本发明所提供的表达鲟鱼卵母细胞成熟相关蛋白的重组巴斯德毕赤酵母的构建方法，包括将鲟鱼卵母细胞成熟相关蛋白基因导入作为宿主菌的巴斯德毕赤酵母中得到表达鲟鱼卵母细胞成熟相关蛋白的重组巴斯德毕赤酵母的步骤；

所述鲟鱼卵母细胞成熟相关蛋白的名称为GtHIIβα，是如下a）或b）或c）的蛋白质：

a）氨基酸序列如SEQ ID No.2第1-221位所示的蛋白质；

b）氨基酸序列如SEQ ID No.2所示的蛋白质；

c）将a）或b）经过取代和/或缺失和/或添加一个或几个氨基酸残基得到的与鲟鱼卵母细胞成熟相关的由a）衍生的蛋白质。

其中，SEQ ID No.2由227个氨基酸残基组成，第222-227位为6个组氨酸标签。

为了使上述a）中的蛋白便于纯化，可在上述a）的氨基末端或羧基末端连接上如表1所示的标签。

表1标签的序列

标签残基序列Poly-Arg5-6（通常为5个）RRRRRPoly-His2-10（通常为6个）HHHHHHFLAG8DYKDDDDKStrep-tag II8WSHPQFEKc-myc10EQKLISEEDL

上述c）中的蛋白质可先合成其编码基因，再进行生物表达得到。

上述构建方法中，所述鲟鱼卵母细胞成熟相关蛋白基因可为如下1）-6）中任一所述的DNA分子：

1）编码权利要求1所述蛋白质的DNA分子；