[发明专利]黄曲霉中与唑类药物敏感性相关的蛋白AFLA-216及其编码基因与应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种黄曲霉中与唑类药物敏感性相关的蛋白AFLA-216及其编码基因与应用。

背景技术

随着高效广谱抗生素的广泛应用，抗肿瘤治疗的深入开展，器官移植和外科其它介入性治疗的不断实施，皮质类固醇激素的广泛应用，以及AIDS患者的不断增多，侵袭性曲霉病（Invasive aspergillosis，IA）的发生呈现出上升趋势，而且病情十分严重，在白血病和骨髓移植受者等重症免疫受损机体中的死亡率常超过90%，已经成为这群患者发生死亡的主要原因。这种情况的出现，除主要与IA的发病机制不够清楚，IA的诊断手段不够精确可靠外，更是与IA药物治疗效果欠佳有着密切的关系。

除烟曲霉外，IA主要由黄曲霉感染引起。目前，主要使用抗真菌药物如两性霉素B（AMB）、伊曲康唑（ITC）、伏立康唑（VRC）、氟康唑（FLC）和卡泊芬净（CAS）来治疗由黄曲霉引起的IA。但近年来在临床上已经出现了对伏立康唑耐药的黄曲霉所致的感染。

发明内容

本发明的目的是提供一种黄曲霉中与唑类药物敏感性相关的蛋白AFLA-216及其编码基因与应用。

本发明所提供的与唑类药物敏感性相关的蛋白质，来源于黄曲霉(Aspergillus flavus)，名称为AFLA-216，该蛋白质是如下（a）或（b）的蛋白质：

（a）由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质；

（b）将序列1的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且与黄曲霉对唑类药物敏感性相关的由序列表序列1衍生的蛋白质。

序列表中的序列1由201个氨基酸残基组成。

为了使上述（a）中的蛋白便于纯化，可在由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质的氨基末端或羧基末端连接上如表1所示的标签。

表1标签的序列

标签残基序列Poly-Arg5-6（通常为5个）RRRRRPoly-His2-10（通常为6个）HHHHHHFLAG8DYKDDDDKStrep-tag II8WSHPQFEKc-myc10EQKLISEEDL

上述（b）中的蛋白可人工合成，也可先合成其编码基因，再进行生物表达得到。上述（b）中的蛋白的编码基因可通过将序列表中序列2所示的DNA序列中缺失一个或几个氨基酸残基的密码子，和/或进行一个或几个碱基对的错义突变，和/或在其5′端和/或3′端连上表1所示的标签的编码序列得到。

编码所述蛋白质的基因也属于本发明的保护范围。

编码所述蛋白质的基因为如下1）或2）或3）的基因：

1）序列表中序列2所示的DNA分子；

2）在严格条件下与1）限定的DNA序列杂交且编码与黄曲霉对唑类药物敏感性相关的蛋白的DNA分子；