[发明专利]一种转基因成分超灵敏检测探针和引物有效
申请号: | 201310233912.9 | 申请日: | 2013-06-13 |
公开(公告)号: | CN103352075A | 公开(公告)日: | 2013-10-16 |
发明(设计)人: | 凌杏园;章桂明;娄定风;潘广;陈枝楠;康林;程颖慧;叶奕优;向才玉;龙海;冯建军;陈菲 | 申请(专利权)人: | 深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/11 |
代理公司: | 深圳鼎合诚知识产权代理有限公司 44281 | 代理人: | 彭家恩;彭愿洁 |
地址: | 518045 *** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 转基因 成分 灵敏 检测 探针 引物 | ||
1.一种用于转基因成分检测的探针试剂,所述探针试剂的序列中其5’端和3’端分别标记有荧光发光基团和荧光淬灭基团,其特征在于:所述探针试剂的序列长度为10~20bp,所述探针的序列中具有至少一个锁核酸,所述锁核酸选自A、C、G、T、U和mC中的至少一种。
2.根据权利要求1所述的探针试剂,其特征在于:所述探针试剂包括检测转基因CaMV35S的探针、检测转基因NOS的探针和检测转基因FMV35S的探针中的至少一条。
3.根据权利要求2所述的探针试剂,其特征在于:所述检测转基因CaMV35S的探针具有Seq ID No.3所示序列,所述检测转基因NOS的探针具有Seq ID No.6所示序列,所述检测转基因FMV35S的探针具有Seq ID No.9所示序列。
4.根据权利要求3所述的探针试剂,其特征在于:Seq ID No.3所示序列的检测转基因CaMV35S的探针中,第8位的碱基“A”、第11位的碱基“C”和第14位的碱基“G”均为锁核酸;
Seq ID No.6所示序列的检测转基因NOS的探针中,第6位的碱基“G”和第13位的碱基“A”均为锁核酸;
Seq ID No.9所示序列的检测转基因FMV35S的探针中,第6位的碱基“A”、第10位的碱基“G”和第14位的碱基“T”均为锁核酸。
5.一种与权利要求3或4所述的探针试剂配合用于转基因成分检测的引物试剂,其特征在于:所述引物试剂包括检测转基因CaMV35S的引物组、检测转基因NOS的引物组和检测转基因FMV35S的引物组中的至少一组;
所述检测转基因CaMV35S的引物组具有Seq ID No.1所示序列和Seq ID No.2所示序列,所述检测转基因NOS的引物组具有Seq ID No.4所示序列和Seq ID No.5所示序列,所述检测转基因FMV35S的引物组具有Seq ID No.7所示序列和Seq ID No.8所示序列。
6.一种转基因成分的检测方法,包括针对靶标转基因设计实时荧光PCR引物和探针,然后采用所述引物和探针对靶标转基因进行实时荧光PCR检测,其特征在于:所述探针的序列中具有至少一个锁核酸,所述锁核酸选自A、C、G、T、U和mC中的至少一种。
7.根据权利要求6所述的检测方法,其特征在于:所述靶标转基因包括CaMV35S、NOS和FMV35S中的至少一种。
8.根据权利要求7所述的检测方法,其特征在于:检测靶标转基因CaMV35S的引物为Seq ID No.1所示序列和Seq ID No.2所示序列,探针为Seq ID No.3所示序列;
检测靶标转基因NOS的引物为Seq ID No.4所示序列和Seq ID No.5所示序列,探针为Seq ID No.6所示序列;
检测靶标转基因FMV35S的引物为Seq ID No.7所示序列和Seq ID No.8所示序列,探针为Seq ID No.9所示序列。
9.根据权利要求8所述的检测方法,其特征在于:Seq ID No.3所示序列的探针中,第8位的碱基“A”、第11位的碱基“C”和第14位的碱基“G”均为锁核酸;
Seq ID No.6所示序列的探针中,第6位的碱基“G”和第13位的碱基“A”均为锁核酸;
Seq ID No.9所示序列的探针中,第6位的碱基“A”、第10位的碱基“G”和第14位的碱基“T”均为锁核酸。
10.一种用于转基因成分检测的试剂盒,其特征在于:所述试剂盒中含有权利要求1~4任一项所述的探针试剂和/或权利要求5所述的引物试剂。
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