[发明专利]转基因棉花GHB119的品系特异性检测方法及其试剂盒有效
申请号: | 201310234192.8 | 申请日: | 2013-06-13 |
公开(公告)号: | CN103333959A | 公开(公告)日: | 2013-10-02 |
发明(设计)人: | 李想;宋青;谌鸿超;高琴;潘良文;吕蓉;杨捷琳;刘月明 | 申请(专利权)人: | 中华人民共和国上海出入境检验检疫局 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/11 |
代理公司: | 上海专利商标事务所有限公司 31100 | 代理人: | 陈静 |
地址: | 200135 上*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 转基因 棉花 ghb119 品系 特异性 检测 方法 及其 试剂盒 | ||
1.一种鉴定转基因棉花GHB119成分的方法,其特征在于,所述方法包括:
以待测样品的DNA为模板,以引物进行PCR扩增;若发生特异性扩增,则表明待测样品中包含转基因棉花GHB119成分;
所述的引物选自:
(a)SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示的引物对;
(b)SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5所示的引物对;
(c)SEQ ID NO:6和SEQ ID NO:7所示的引物对;
(d)SEQ ID NO:8和SEQ ID NO:9所示的引物对;或
(e)SEQ ID NO:11和SEQ ID NO:12所示的引物对。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,以SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示的引物以及SEQ ID NO:3所示的荧光探针进行实时荧光PCR检测;或
以SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5所示的引物以及SEQ ID NO:3所示的荧光探针进行实时荧光PCR检测;或
以SEQ ID NO:6和SEQ ID NO:7所示的引物对以及SEQ ID NO:3所示的荧光探针进行实时荧光PCR检测;或
以SEQ ID NO:8和SEQ ID NO:9所示的引物对以及SEQ ID NO:10所示的荧光探针进行实时荧光PCR检测;或
以SEQ ID NO:11和SEQ ID NO:12所示的引物对以及SEQ ID NO:10所示的荧光探针进行实时荧光PCR检测。
3.用于鉴定转基因棉花GHB119成分的引物,其特征在于,所述的引物选自:
(a)SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示的引物对;
(b)SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5所示的引物对;
(c)SEQ ID NO:6和SEQ ID NO:7所示的引物对;
(d)SEQ ID NO:8和SEQ ID NO:9所示的引物对;或
(e)SEQ ID NO:11和SEQ ID NO:12所示的引物对。
4.用于鉴定转基因棉花GHB119成分的荧光探针,其特征在于,所述的探针序列如SEQ ID NO:3和/或SEQ ID NO:10所示。
5.权利要求3所述的引物和权利要求4所述的荧光探针的用途,用于从待测样品中鉴定转基因棉花GHB119成分。
6.一种鉴定转基因棉花GHB119成分的试剂盒,其特征在于,其中包括:
SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示的引物,SEQ ID NO:3所示的荧光探针;和/或
SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5所示的引物,SEQ ID NO:3所示的荧光探针;和/或
SEQ ID NO:6和SEQ ID NO:7所示的引物,SEQ ID NO:3所示的荧光探针;和/或
SEQ ID NO:8和SEQ ID NO:9所示的引物,SEQ ID NO:10所示的荧光探针;和/或
SEQ ID NO:11和SEQ ID NO:12所示的引物,SEQ ID NO:10所示的荧光探针。
7.如权利要求6所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒中还包括:含有转基因棉花GHB119成分的DNA的检测阳性对照品。
8.如权利要求7所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒中还包括选自以下的试剂:DNA提取试剂,PCR缓冲液,DNA聚合酶,和/或说明鉴定转基因棉花GHB119成分的方法的使用说明书。
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