[发明专利]一种坏死梭杆菌重组OMP蛋白及制备方法

权利要求书

1.一种梭杆菌属坏死梭杆菌，命名为：梭杆菌属坏死梭杆菌（Fusobacterium necrophorum），简称：FN(An)； 2013年4月19日保藏《中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心》，保藏号为：CGMCC 7672。

2. 一种坏死梭杆菌重组OMP蛋白，其特征在于：其氨基酸序列如SEQ ID No.1所示，其核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。

3.权利要求2所述的坏死梭杆菌重组OMP蛋白的制备方法，其特征在于：

A、以权利1所述的FN（An）基因组DNA为模板，按照如SEQ ID No.3和SEQ ID No.4所示的上下游引物PCR扩增获得坏死梭杆菌OMP基因片段，与pMD^?18-T Simple连接，形成pMD^?18-T Simple-OMP重组质粒；

B、限制性内切酶XhoI和EcoRI双酶切pMD^?18-T Simple-OMP和原核表达载体pET28a(+)，连接，获得重组原核表达质粒pET28a-OMP；

C、将上述获得的重组质粒pET28a-OMP转化表达宿主菌，IPTG诱导表达，获得坏死梭杆菌重组OMP蛋白粗品。

4. 根据权利要求3所述坏死梭杆菌重组OMP蛋白的制备方法，其特征在于：步骤C中的表达菌株为BL21；基因工程菌在IPTG终浓度大于0.4mmol/L，诱导温度高于16°C时，均可获得坏死梭杆菌重组OMP蛋白。

5. 权利要求2所述坏死梭杆菌重组OMP蛋白用于制备预防坏死梭杆菌病的基因工程亚单位疫苗。