[发明专利]一种从赭色小莫勒菌中高效提取3β-乙酰基-15α，22-二羟基何帕烷酮的方法

权利要求书

1.一种从赭色小莫勒菌中高效提取三萜类物质3β-乙酰基-15α，22-二羟基何帕烷酮的方法，其特征在于：所述方法步骤包括菌株培养、有机溶剂萃取、硅胶柱分离、薄层色谱纯化、重结晶。

2.根据权利要求1所述的从赭色小莫勒菌中高效提取三萜类物质3β-乙酰基-15α，22-二羟基何帕烷酮的方法，其特征在于：具体步骤如下：

1) 菌株培养：取赭色小莫勒菌的菌块接种到PDB培养基中，在100~160 r/min、24~28℃条件下连续培养7~10 d即一级培养，按8％~10％接种量再次转接到PDB培养基中，在100~160 r/min、24~28℃条件下再连续培养7~10 d即二级培养，按8％~10％接种量再次转接到PDB培养基中，在24℃~28℃条件下静止培养35~40 d即三级培养；

2) 有机溶剂萃取：三级培养的菌液与菌丝体过滤分离，菌液用乙酸乙酯摇瓶萃取，菌液与乙酸乙酯的体积比=2：1～1:1，摇瓶转速150 r/min～250 r/min，温度15～20℃，摇5 h～10 h后，静止12 h～20 h,旋蒸乙酸乙酯部分浓缩得浸膏，回收乙酸乙酯；

3）硅胶柱分离：1倍浸膏体积的乙酸乙酯溶解浸膏，加样于200-300目硅胶柱上，用洗脱液洗脱，收集含有目标物的流出液，旋蒸浓缩得粗提物；

4）薄层色谱纯化：将粗提物用1倍浸膏体积的乙酸乙酯溶解，点样到薄层色谱板上，放入层析缸中，层析液为甲醇：二氯甲烷体积比=1:20的展开体系；待展开体系爬到板的上沿时取出薄层制备色谱板，沿直线刮取R_f=0.43处的硅胶，氯仿浸泡刮取的硅胶，过滤除去硅胶，旋蒸浓缩氯仿浸泡液，得白色物质；

5）重结晶：白色物质用氯仿溶解，放在4℃冰箱里挥干，得白色晶体物质即赭色小莫勒菌中3β-乙酰基-15α，22-二羟基何帕烷酮。

3. 根据权利要求书2所述的菌株培养方法，其特征在于：所述的PDB培养基为：4 g马铃薯粉，20 g葡萄糖，沸水煮30 min，经4层纱布过滤后加单蒸水定容至1 L。

4.根据权利要求2所述的硅胶柱分离方法，其特征在于：洗脱液为石油醚：乙酸乙酯体积比=15:1，等度洗脱，洗7～10个柱体积。