[发明专利]一种巴氏醋杆菌及其应用

权利要求书

1.巴氏醋杆菌（Acetobacterpasteurianus）Ab3,保藏编号为CCTCC NO：M2013116。

2.如权利要求1所述的巴氏醋杆菌Ab3在发酵生产二羟基神经酰胺中的应用。

3.如权利要求1所述的巴氏醋杆菌Ab3在发酵生产食醋中的应用。

4.一种利用如权利要求1所述的巴氏醋杆菌Ab3发酵生产二羟基神经酰胺的方法，其特征在于包括以下工艺步骤：

1）将所述的巴氏醋杆菌Ab3接种于营养培养基上，进行斜面培养；

2）对斜面培养得到的菌苔进行种子培养，得到种子液；

3）将种子液接种到发酵培养基中培养，得到巴氏醋杆菌Ab3发酵液和细胞菌泥，所述的发酵液即为食醋，所述的细胞菌泥分离提取后获得二羟基神经酰胺。

5.如权利要求4所述的一种利用巴氏醋杆菌Ab3发酵生产二羟基神经酰胺的方法，其特征在于所述的步骤1）中营养培养基的重量百分配比为5～6Bx^o麦芽汁，0.02～0.05% KH₂PO₄、0.01～0.03% MgSO₄、 0.05～0.1% CaCl₂、乙醇3～5%、琼脂1.5～2%，所述的营养培养基的pH=4.5～6.5，斜面培养温度为28～32 ℃，培养时间2～4天。

6.如权利要求4所述的一种利用巴氏醋杆菌Ab3发酵生产二羟基神经酰胺的方法，其特征在于所述的步骤2）中用0.9%生理盐水将斜面上培养的菌苔制成细胞悬液，并接种到100 mL种子培养基中培养，所述的种子培养基的重量百分配比为2～4%葡萄糖、0.5～1%酵母膏、0.1～0.3%蛋白胨、0.08～0.2% KH₂PO₄、0.01～0.03% MgSO₄、5～7%乙醇，水余量，所述的种子培养基的pH=4.0～5.0，培养温度30～33 ℃，转速120rpm，培养时间1～2天。

7.如权利要求4所述的一种利用巴氏醋杆菌Ab3发酵生产二羟基神经酰胺的方法，其特征在于所述的步骤3）中发酵培养基的重量百分配比为3～5%葡萄糖、0.5～1.5%复合氨基酸溶液、0.5～1%酵母膏、0.02～0.05% KH₂PO₄、0.01～0.03% MgSO₄、0.05～0.1% CaCl₂、6～20%乙醇，水余量，所述的发酵培养基pH=4.0～5.0，培养温度32～35℃，转速150～450rpm，培养时间2～4天，其中乙醇的使用量在于间歇式补加。

8.如权利要求4所述的一种利用巴氏醋杆菌Ab3发酵生产二羟基神经酰胺的方法，其特征在于所述的步骤3）中细胞菌泥经冷冻干燥后得到干细胞，采用干细胞:提取液按重量比1:1混合，室温下超声浸泡1.5小时，加萃取液进行萃取，过滤后所得有机相真空浓缩，获得二羟基神经酰胺粗品，所述的提取液中氯仿:乙醇:水的体积比为1:1:0.8，所述的萃取液中氯仿:水的体积比为1:1.25。

9.如权利要求8所述的一种利用巴氏醋杆菌Ab3发酵生产二羟基神经酰胺的方法，其特征在于所述的干细胞采用超临界CO₂萃取，所得CO₂/乙醇流动相动挥发后，获得获得二羟基神经酰胺粗品。

10.如权利要求8或9所述的一种利用巴氏醋杆菌Ab3发酵生产二羟基神经酰胺的方法，其特征在于所述的二羟基神经酰胺粗品采用高速逆流色谱分离精制，获得二羟基神经酰胺精品。