[发明专利]PRRSV基因标记疫苗株ELISA鉴别诊断试剂盒及方法和应用

权利要求书

1.一种PRRSV基因标记疫苗株ELISA鉴别诊断试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包含25aa多肽抗原，该25aa多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包含ELISA酶标板、封闭液、血清稀释液、酶标二抗、显示液、终止液、标准阳性血清、标准阴性血清。

3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述25aa多肽抗原的包被浓度为500ng/孔。

4.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述封闭液为5％重量浓度的脱脂乳。

5.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述血清稀释液为2％重量浓度的牛血清白蛋白。

6.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述血清稀释液对血清的稀释度为1∶40。

7.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述酶标二抗为辣根过氧化物酶标记的山羊抗猪抗体，其稀释度为1∶8000。

8.一种非诊断目的的PRRSV基因标记疫苗株ELISA鉴别方法，其特征在于，包括以下步骤：

用25aa多肽抗原包被ELISA酶标板，该25aa多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示；

将待测血清与包被抗原作用后，依次加入酶标二抗、显色液和终止液；

利用酶标仪读取吸光度值OD₄₅₀nm，并按公式：S/P＝(待测血清样品OD-阴性对照OD)/(阳性对照OD-阴性对照OD)，计算待测血清样品的S/P值；

待测血清样品S/P值≥临界值的判为阳性，S/P值＜临界值的判为阴性，所述临界值是通过ROC统计学分析方法获得的当灵敏度和特异度数值之和最大时对应的S/P值。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述待测血清的稀释度为1∶40。

10.权利要求1所述试剂盒在制备鉴别诊断PRRS基因工程标记疫苗免疫猪的产品中的应用。