[发明专利]乳胶增强型AFP检测试剂盒及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种乳胶增强型AFP检测试剂盒，其特征在于，包括R1试剂、R2试剂、校准品；

其中，所述R1试剂包括：PH7.3-7.5的Tris缓冲液50-100mmol/l、Dextran8000-100003-4％、和乙二胺四乙酸二钠20-40mmol/L；

所述R2试剂包括：鼠抗人AFP单克隆抗体、聚苯乙烯胶乳包被、PH7.0-7.4的磷酸盐缓冲液、和乙二胺四乙酸二钠；

所述校准品包括：叠氮钠0.6-2.2％、吐温-20 2-8％、牛血清白蛋白1-3％。

2.如权利要求1所述的乳胶增强型AFP检测试剂盒，其特征在于，所述R2试剂中，所述鼠抗人AFP单克隆抗体和所述聚苯乙烯胶乳包被的质量比为1/10-2/10。

3.一种乳胶增强型AFP检测试剂盒的制备方法，其特征在于，采用聚苯乙烯纳米微球作为单克隆抗体载体，制备得到如权利要求1所述的乳胶增强型AFP检测试剂盒；包括：

制备R1试剂：将Tris50mmol/l、Dextran 8000 3.5％和乙二胺四乙酸二钠20mmol/L溶解调节PH值至7.3；

制备R2试剂：将鼠抗人AFP单克隆抗体和180-220nm的聚苯乙烯胶乳粒子以10∶100的质量比混合，缓冲液采用0.02M的磷酸缓冲液，将两者混匀后37℃吸附8小时，之后透析除去未连接上的抗体，加入封闭液0.1％牛血清白蛋白和0.2mm的甘氨酸，封闭2小时，离心去上清，用PH7.4磷酸盐缓冲液45mmol/l，乙二胺四乙酸二钠10.2mmol/l，0.05％牛血清白蛋白，0.9％NaN3稀释至0.18％；

制备校准品：将经过处理的牛血清，加入BSA 0.1％，NaN3 0.9％得到校准品稀释液。

4.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，抗体包被过程中，封闭液组分包括0.6-1.2％牛血清白蛋白、10-50mm的甘氨酸，胶乳稀释液组分包括PH7.0-7.6磷酸盐缓冲液30-80mmol/l，0.5-1.5％牛血清白蛋白，0.9％NaN3。

5.乳胶增强型AFP检测试剂盒在检测AFP中的应用。