[发明专利]一种测定蔬果中百菌清、克菌丹、敌菌丹和灭菌丹残留的方法

说明书

技术领域

本发明涉及农药残留的检测及应用技术领域，特别涉及测定蔬菜水果中百菌清、克菌丹、敌菌丹和灭菌丹农药残留量的测定。

背景技术

百菌清是一种非内吸性的取代苯类广谱性杀菌剂，克菌丹、灭菌丹和敌菌丹是一类多作用点的酞酰亚胺类广谱保护性杀菌剂，这四种杀菌剂对多种作物的真菌病害灭杀效果好，药害小，且有预防作用，广泛应用于水果蔬菜等农作物上。国外发达国家已经明确限定这几种农药在蔬菜水果中的最高残留限量，如日本肯定列表中规定蔬菜水果中敌菌丹不得检出，萝卜和苹果中百菌清的最高残留限量（MRL）分别为0.1mg/kg和2.0mg/kg，欧盟规定萝卜和菠菜中克菌丹的最高残留限量为0.1mg/kg等。这四种农药在碱性环境下不稳定，在有些蔬菜水果中的添加回收率低于35%，现有的文献检测方法和标准方法，多数没有涉及这四种农药在碱性环境下不稳定的问题，有的文献和标准方法则在样品打碎后，提取前加入磷酸或ZnAc溶液来提高克菌丹、灭菌丹、敌菌丹和百菌清的稳定性，但这四种农药在某些样品打碎时就会降解，因此作为一个阳性样品，在样品制备时直接将样品打碎，即使提取前再加磷酸来改变提取环境的pH值，并不能得到准确可靠的定量结果。

发明内容

针对现有技术中存在的缺陷，本发明的目的在于提供一种测定蔬果中百菌清、克菌丹、敌菌丹和灭菌丹残留的方法，该方法回收率高、测定更加准确。

为达到以上目的，本发明采取的技术方案是：

一种测定蔬果中百菌清、克菌丹、敌菌丹和灭菌丹残留的方法，其特征在于：具体步骤包括:

1、样品的制备：将叶菜类样品切成2—3 cm的段，果实类样品切成长、宽、高约2—3cm的块；

2、用磷酸处理样品：加入磷酸溶液对样品进行处理，搅碎、混合，制备成均匀样品；

3、用乙腈提取目标物：步骤2所得样品内加入乙腈，进行高速均质和离心，离心后得到提取液，然后将提取液进行减压浓缩；

4、去除提取液中的磷酸和水溶性杂质：固相支持液液萃取柱内部填充Hydromatrix-硅藻土吸附剂，将浓缩后提取液过固相支持液液萃取柱，平衡10min，用不溶于水的乙酸乙酯洗脱，收集洗脱液，进行浓缩至近干，待净化；

5、用弗罗里硅土小柱和氨丙基粉进一步净化：用10mL正己烷活化小柱，用3×2mL正己烷将上述制备的样品残渣转移至弗罗里硅土小柱中，然后用5%乙酸乙酯-正己烷15mL洗脱，收集洗脱液，并在40℃水浴上减压浓缩至近干，用正己烷准确定容至2.0mL，加入氨丙基粉150mg，涡混2分钟，过0.45μm有机相滤膜入进样小瓶，供气相色谱测定； 

6、用Agilent7890A气相色谱仪—电子捕获检测器进行检测：利用Agilent7890A气相色谱仪—电子捕获检测器来测定，选用DB-5石英毛细管柱，将色谱柱温度设为60℃，保持1.25min；以20℃/min升至180℃，保持7min；再以5℃/min升至230℃，保持7min；再以30℃/min升至270℃，保持5min；检测器温度设为300℃，进样口温度设为250℃，用高纯氮作载气，将柱流量设为1.4mL/min，尾吹气流量30mL/min, 将进样小瓶摆放到气相色谱仪的样品盘中，待仪器稳定后，进样测定，进样量1μL；外标法定量，计算农药的测定值。

以下是对上述技术方案的进一步优化：

加入磷酸溶液对样品进行处理的用量为：称取100g样品，加入5%磷酸溶液50g。

用乙腈提取目标物的步骤包括：称取用5%磷酸溶液处理好的样品15g，置于100mL塑料离心管中，加入乙腈40mL，高速均质2min，以5000r/min速度进行离心5min，提取液移入旋转蒸发瓶中，于旋转蒸发仪上在40℃水浴条件下减压浓缩。

所述Hydromatrix-硅藻土吸附剂是以硅藻属的化石为原料，经过高温纯化制成的具有高水可润湿比表面的吸附剂。

所述步骤4中乙酸乙酯的用量为100ml。

所述步骤4中，将洗脱液置于旋转蒸发仪中，控制旋转蒸发仪的压力为0.016MPa，于40℃水浴减压浓缩。

所述高纯氮为纯度＞99.999%的氮气。

气相色谱仪的进样口衬管用干净的惰性化内表面的衬管。

本发明采用以上技术方案，与现有技术相比具有以下优点：