[发明专利]检测阴道加德纳杆菌的引物、探针及方法和试剂盒无效
申请号: | 201310242560.3 | 申请日: | 2013-06-19 |
公开(公告)号: | CN103333961A | 公开(公告)日: | 2013-10-02 |
发明(设计)人: | 车团结;徐进章;尤崇革;黄超杰;李琳 | 申请(专利权)人: | 兰州百源基因技术有限公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/06;C12N15/11;G01N21/64 |
代理公司: | 北京中恒高博知识产权代理有限公司 11249 | 代理人: | 高松 |
地址: | 730000 甘*** | 国省代码: | 甘肃;62 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 检测 阴道 加德纳 杆菌 引物 探针 方法 试剂盒 | ||
1.一种检测阴道加德纳杆菌的特异性引物,其扩增产物的核苷酸序列如SEQ ID NO.9所示。
2.根据权利要求1所述的特异性引物,其核苷酸序列为:
上游引物:CTTTTCTCGGCAAGCAGGAT,
下游引物:TTCCGTGGCTAAGCGTGT;
或其互补核苷酸序列,向5’端和3’方向延伸一至数个碱基或删减一至数个碱基得到的序列。
3.与权利要求1或2所述引物配合使用的荧光探针。
4.根据权利要求3所述的荧光探针,其核苷酸序列为:
FAM-CCTTACAGCCTACCCATCACGCCTCAGC-TAMRA;或
荧光报告基团为TET、JOE、HEX或VIC,荧光淬灭基团为DABCYL或BHQ;
或其互补核苷酸序列,向5’端和3’方向延伸一至数个碱基或删减一至数个碱基得到的序列。
5.一种阴道加德纳杆菌的检测方法,是以样品总DNA 为模板,利用权利要求1 或2 所述的引物和权利要求3 或4 所述探针进行实时荧光定量PCR,根据扩增曲线判定结果。
6.根据权利要求5所述的检测方法,其特征在于:实时荧光定量PCR的反应体系为:
。
7.根据权利要求5或6所述的检测方法,其特征在于:实时荧光定量PCR的反应条件为:94℃ 预变性2分钟,94℃ 15秒、60℃ 40s并收集荧光信号,40个循环。
8.含有权利要求1 或2 所述引物和/ 或权利要求3 或4 所述探针的试剂盒。
9.根据权利要求8 所述的试剂盒,其还包括标准品,所述标准品含有阴道加德纳杆菌基因组DNA。
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