[发明专利]一种噬菌体展示随机肽库的构建方法

权利要求书

1.一种噬菌体展示随机肽库的构建方法，包括：

(1)采用NNK编码方式，其中N代表任意核苷酸，K代表G或T，可指导合成全部20种氨基酸。将编码随机肽库的两条链经退火、延伸后进行双酶切；

(2)将载体经与(1)同样的双酶切后，进行5’去磷酸化；

(3)将(1)获得的随机序列与(2)获得的脱磷酸载体进行连接，电转TG1感受态细胞构建随机肽库；

(4)取扩增后的TG1肽库菌液，梯度稀释后涂布SOB平板，计算库容。随机挑取克隆进行测序，对其多样性进行检验。

2.根据权利要求1或2所述方法，其特征在于，所述文库构建为噬菌体展示随机6-16肽库。

3.根据权利要求2所述方法，其特征在于步骤(1)中所采用的载体为噬菌粒pCANTAB5E。

4.根据权利要求1-3所述方法构建的噬菌体展示随机肽库。

5.权利要求4所述噬菌体展示随机肽库的用途，其特征在于：利用该肽库筛选获得的肽段序列，通过测序分析即可得到与药物特异性结合的外源蛋白或多肽。该技术广泛应用于抗原表位的模拟和蛋白、核酸结合特性的研究，同时在药物筛选和疫苗研制方面也有广泛的应用。