[发明专利]重组共表达维生素K环氧化物还原酶亚基1以提高依赖维生素K的蛋白质表达

权利要求书

1.一种宿主生物体，其含有编码维生素K还原酶复合体亚基1(VKORC1)或其功能活性衍生物的重组核酸、以及编码依赖于维生素K的(VKD)蛋白质或其功能活性衍生物的重组核酸，其中重组VKORC1和重组VKD蛋白质在所述宿主生物体中都得到表达。

2.如权利要求1所述的宿主生物体，其特征在于，所述编码重组VKORC1的核酸或所述编码重组VKD蛋白质的核酸分别地、或者两者同时地通过选自由诱导表达、瞬时表达和固定表达所组成的模式组的表达模式进行表达。

3.如权利要求1或2所述的宿主生物体，其特征在于，所述宿主生物体是哺乳动物细胞。

4.如权利要求3所述的宿主生物体，其特征在于，所述哺乳动物细胞是从选自CHO细胞和HEK293细胞的哺乳动物细胞株衍生的细胞。

5.如权利要求1至4中任一项所述的宿主生物体，其特征在于，所述重组VKD蛋白质是促凝血因子或其功能活性衍生物。

6.如权利要求5所述的宿主生物体，其特征在于，所述促凝血因子选自由因子II、因子VII、因子IX和因子X所构成的因子组。

7.如权利要求6所述的宿主生物体，其特征在于，所述促凝血因子是人类因子IX。

8.一种包含细胞的细胞培养系统，所述细胞含有编码维生素K还原酶复合体亚基1(VKORC1)或其功能活性衍生物的重组核酸、以及编码依赖于维生素K的(VKD)蛋白质或其功能活性衍生物的重组核酸，其中重组VKORC1和重组VKD蛋白质在所述细胞中都得到表达。

9.如权利要求8所述的细胞培养系统，其特征在于，所培养的细胞是哺乳动物细胞。

10.如权利要求9所述的细胞培养系统，其特征在于，所述哺乳动物细胞选自CHO细胞和HEK293细胞。

11.如权利要求8至10中任一项所述的细胞培养系统，其特征在于，所述重组VKD蛋白质是促凝血因子或其功能活性衍生物。

12.如权利要求11所述的细胞培养系统，其特征在于，所述促凝血因子选自由因子II、因子VII、因子IX和因子X所构成的因子组。

13.如权利要求12所述的细胞培养系统，其特征在于，所述促凝血因子是人类因子IX。

14.一种提高在宿主生物体中表达重组的依赖于维生素K的(VKD)蛋白质或其功能活性衍生物的生产率的方法，其包括下述步骤：

(a)提供宿主生物体；

(b)将编码VKD蛋白质或其功能活性衍生物的重组核酸插入到步骤(a)的宿主生物体中；

(c)将编码维生素K还原酶复合体亚基1(VKORC1)或其功能活性衍生物的重组核酸插入到步骤(a)的宿主生物体中；以及

(d)表达步骤(b)和(c)所述重组核酸。

15.一种提高在宿主生物体中表达重组的依赖于维生素K的(VKD)蛋白质或其功能活性衍生物的生产率的方法，其包括下述步骤：

(a)提供一种编码VKD蛋白质或其功能活性衍生物的重组核酸被整合入其基因组的宿主生物体；

(b)将编码维生素K还原酶复合体亚基1(VKORC1)或其功能活性衍生物的重组核酸插入到步骤(a)的宿主生物体中；以及

(c)表达步骤(a)和(b)所述核酸。

16.如权利要求15所述的方法，其特征在于，稳定地表达所述编码VKD蛋白质或其功能活性衍生物的重组核酸。

17.一种提高在宿主生物体中表达重组的依赖于维生素K的(VKD)蛋白质或其功能活性衍生物的生产率的方法，其包括下述步骤：

(a)提供一种编码维生素K还原酶复合体亚基1(VKORC1)或其功能活性衍生物的重组核酸被整合入其基因组的宿主生物体；

(b)将编码VKD蛋白质或其功能活性衍生物的重组核酸插入到步骤(a)的宿主生物体中；以及

(c)表达步骤(a)和(b)所述核酸。

18.如权利要求17所述的方法，其特征在于，稳定地表达所述编码VKORC1或其功能活性衍生物的重组核酸。