[发明专利]具有肾素和ACE双重抑制活性的小肽及应用

权利要求书

1.一种具有肾素和ACE双重抑制活性的小肽，氨基酸序列为Leu-Tyr。

2.一种权利要求1所述小肽的制备方法，其特征在于包括如下步骤：

（1）将菜籽粕粉碎，分散于蒸馏水中，用碱液调节pH 为10.5-11.5，并维持pH不变，搅拌1-2 h，离心后分离上清液和沉淀，所述上清液为菜籽蛋白粗提液，所述沉淀为残渣；调节所述菜籽蛋白粗提液的pH为4-5，静置后离心取沉淀，即得菜籽蛋白粗提物；

（2）将所述菜籽蛋白粗提物用蛋白酶 Alcalase水解，得到菜籽蛋白水解物；

（3）将所述菜籽蛋白水解物采用高效液相色谱分离，得到所述小肽。

3.根据权利要求2所述小肽的制备方法，其特征在于：将步骤（1）中所述残渣分散于蒸馏水中，用碱液调节pH 为10.5-11.5，并维持pH不变，搅拌，离心后取上清液，所述上清液为菜籽蛋白粗提液。

4.根据权利要求3所述小肽的制备方法，其特征在于：步骤（2）所述水解的具体方法为：将菜籽蛋白粗提物冷冻干燥后溶于水，调节pH为7.5-8.5，加入蛋白酶Alcalase，在45-55℃条件下进行水解反应。

5.根据权利要求4所述小肽的制备方法，其特征在于：步骤（3）的具体方法为：将所述菜籽蛋白水解物依次采用Jupiter C12 色谱柱和Vydac C18色谱柱进行分离，得到所述小肽。

6.根据权利要求5所述小肽的制备方法，其特征在于：将所述菜籽蛋白水解物采用Jupiter C12 色谱柱分离的具体方法为：

将菜籽蛋白水解物上样于Jupiter C12 色谱柱，用流动相A和B进行洗脱，洗脱程序：0～35 min，流动相B 5～80%线性升高，流动相A 95～20%线性降低，收集对应于流动相B体积浓度为60-70%时的洗脱液F5；

将洗脱液F5再次采用Jupiter C12 色谱柱分离，用流动相A和B进行洗脱，洗脱程序为： 0～40 min，流动相A 35～30%线性降低，流动相B 65～70%线性升高，收集对应于流动相B体积浓度为67-68%时的洗脱液F5-F；

所述流动相A：质量百分浓度为0.05-0.2%三氟乙酸的水溶液；所述流动相B：质量百分浓度为0.05-0.2%三氟乙酸的甲醇溶液。

7.根据权利要求4所述小肽的制备方法，其特征在于：将所述洗脱液F5-F采用Vydac C18色谱柱进行分离的具体方法为：采用流动相A和B进行洗脱，收集对应于流动相B体积浓度为16.5-18.0%时的洗脱液，即得所述小肽；所述流动相A：质量百分浓度为0.05-0.2%三氟乙酸的水溶液；所述流动相B：质量百分浓度为0.05-0.2%三氟乙酸的甲醇溶液；所述洗脱程序：0～60 min，流动相A 95～70%线性降低，流动相B 5-30%线性升高。

8.一种权利要求1所述具有肾素和ACE抑制活性的小肽在制备降血压药物或具有降血压功能的食品中的应用。

9.一种降血压药物组合物，其特征在于含有氨基酸序列为Leu-Tyr的小肽。

10.一种具有降血压功能的食品，其特征在于含有氨基酸序列为Leu-Tyr的小肽。