[发明专利]转基因成分MLPA检测的探针及制备其长探针的引物有效
申请号: | 201310253831.5 | 申请日: | 2013-06-24 |
公开(公告)号: | CN103397087A | 公开(公告)日: | 2013-11-20 |
发明(设计)人: | 凌杏园;陈枝楠;潘广;章桂明;向才玉;康林;程颖慧;龙海;郑耘;陈菲 | 申请(专利权)人: | 深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/11 |
代理公司: | 深圳鼎合诚知识产权代理有限公司 44281 | 代理人: | 彭家恩;彭愿洁 |
地址: | 518045 *** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 转基因 成分 mlpa 检测 探针 制备 引物 | ||
1.一种转基因成分MLPA检测的探针,其特征在于:所述探针包括第一组探针至第十一组探针中的至少一组,每组探针中分别含有长探针和短探针,长探针的5’端具有磷酸化修饰;
第一组探针的长探针含有Seq ID No.1所示序列,短探针含有Seq ID No.2所示序列;
第二组探针的长探针含有Seq ID No.3所示序列,短探针含有Seq ID No.4所示序列;
第三组探针的长探针含有Seq ID No.5所示序列,短探针含有Seq ID No.6所示序列;
第四组探针的长探针含有Seq ID No.7所示序列,短探针含有Seq ID No.8所示序列;
第五组探针的长探针含有Seq ID No.9所示序列,短探针含有Seq ID No.10所示序列;
第六组探针的长探针含有Seq ID No.11所示序列,短探针含有Seq ID No.12所示序列;
第七组探针的长探针含有Seq ID No.13所示序列,短探针含有Seq ID No.14所示序列;
第八组探针的长探针含有Seq ID No.15所示序列,短探针含有Seq ID No.16所示序列;
第九组探针的长探针含有Seq ID No.17所示序列,短探针含有Seq ID No.18所示序列;
第十组探针的长探针含有Seq ID No.19所示序列,短探针含有Seq ID No.20所示序列;
第十一组探针的长探针含有Seq ID No.21所示序列,短探针含有Seq ID No.22所示序列。
2.根据权利要求1所述的探针,其特征在于:还包括第十二组探针至第十五组探针中的至少一组,每组探针中分别含有长探针和短探针,长探针的5’端具有磷酸化修饰;
第十二组探针的长探针含有Seq ID No.23所示序列,短探针含有Seq ID No.24所示序列;
第十三组探针的长探针含有Seq ID No.25所示序列,短探针含有Seq ID No.26所示序列;
第十四组探针的长探针含有Seq ID No.27所示序列,短探针含有Seq ID No.28所示序列;
第十五组探针的长探针含有Seq ID No.29所示序列,短探针含有Seq ID No.30所示序列。
3.根据权利要求2所述的探针,其特征在于:所述第一组探针至第十一组探针依序为检测新霉素-3’-磷酸转移酶基因NPTII、玄参花叶病毒35S外壳蛋白的启动子FMV35S、β-葡萄糖苷酸酶基因GUS、核酸酶基因barnase、barnase基因特有抑制基因Barstar、胭脂碱合成酶3’终止子NOS、花椰菜花叶病毒35S外壳蛋白的启动子CaMV35S、5-烯醇式丙酮莽草酸-3-磷酸合酶基因CP4-EPSPS、草丁膦乙酰转移酶基因PAT、转Bt63基因抗虫水稻特异性基因,以及抗虫蛋白Cry1Ab和CryAc融合基因Cry1Ab/CryAc的探针;所述第十二组探针至第十五组探针依序为检测油菜磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因PEPC、麦谷醇溶蛋白基因GAG56D、马铃薯茎储存蛋白基因Patatin和水稻植物特有的基因gos9的探针。
4.一种转基因成分的MLPA检测方法,其特征在于:采用权利要求1-3任一项所述的探针以受检样品的DNA为模板进行杂交。
5.根据权利要求4所述的检测方法,其特征在于:还包括采用一对通用引物对杂交后连接起来的长探针和短探针进行PCR扩增,所述通用引物的上游/下游引物分别含有Seq ID No.31和Seq ID No.32所示序列。
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