[发明专利]具有抗炎活性的三萜皂苷类化合物、制备方法及其应用

说明书

技术领域

本发明属于三萜皂苷类化合物及其制备和应用技术领域，具体涉及从四倍体绞股蓝中提取分离得到的三萜皂苷类化合物及其制备方法和用途。

背景技术

绞股蓝(Gynostemma pentahyllum(Thunb.)Makino)是葫芦科(Cucurbitaceae)绞股蓝属多年生草质藤本植物。现代研究表明，绞股蓝具有降血糖、降血脂、改善心脑血管系统、增强机体免疫力以及抗肿瘤等广泛的生物活性，且其主要生物活性成分为三萜皂苷类化合物。我们对绞股蓝的化学成分及其生物活性进行了较为系统的研究，发现四倍体绞股蓝的总皂苷含量比二倍体绞股蓝更高，并从四倍体绞股蓝中成功分离得到多个新的三萜皂苷类新化合物，然后进一步对这些化合物进行了抗炎活性的研究。本专利即首次报道了其中六个三萜皂苷类新化合物，及其制备方法和抗炎活性。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供从四倍体绞股蓝中提取分离得到的三萜皂苷类化合物及其制备方法和用途，该化合物及它们的光学异构体、药用盐、溶剂合物具有制备抗炎药物的用途，它们可以以其自身的形式施用，也可以和药学上可以接受的载体组成药物组合物而应用；且制备方法简单易行，所得化合物纯度高，具有良好经济效益和应用前景。

本发明提供一种从四倍体绞股蓝中分离得到的新的具有抗炎活性的六个三萜皂苷类化合物，它们的化学结构式分别如下：

其中，

本发明提供上述六种三萜皂苷类化合物的制备方法，包括：

（1）将四倍体绞股蓝地上部分用溶剂提取，浓缩提取液得浸膏；

（2）将浸膏加水溶解得分散液，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取，萃取后得到正丁醇萃取液，减压回收溶剂，得正丁醇部位浸膏；

（3）将正丁醇部位浸膏与硅胶拌样，上样于硅胶柱上，先以二氯甲烷-甲醇溶液为洗脱剂进行梯度洗脱，减压回收溶剂后再次进行硅胶柱色谱层析，用乙酸乙酯-甲醇溶液进行梯度洗脱，收集洗脱液，减压回收溶剂后进行ODS填料中压柱色谱，以甲醇-水溶液系统进行梯度洗脱，收集含所述化合物的流份，其中一个流份直接以半制备型反相高效液相色谱进行分离纯化，得到所述化合物1和2；另一个流份先经过硅胶色谱柱层析，用三氯甲烷-甲醇溶液系统梯度洗脱，减压回收溶剂后，再通过半制备型反相高效液相色谱进行分离纯化，得到所述化合物3、4、5和6。

所述步骤（1）中为将四倍体绞股蓝的地上部分用溶剂提取2～5次，每次1～3小时，浓缩提取液得浸膏；

所述步骤（1）中的溶剂选自甲醇、乙醇、丙酮或水中的一种或多种的混合物；

所述步骤（2）中的浸膏与水的质量比为1:2～1:15。

所述步骤（2）中石油醚的加入量与分散液的体积比为1:2～5:1；

所述步骤（2）中乙酸乙酯的加入量与分散液的体积比为1:2～5:1；

所述步骤（2）中正丁醇的加入量与分散液的体积比为1:2～5:1。

所述步骤（3）中，二氯甲烷-甲醇溶液以体积比100:1～1:2进行梯度洗脱；乙酸乙酯-甲醇系统以体积比10:1～1:2进行梯度洗脱；再通过ODS填料中压柱色谱进行分离，以5vol%甲醇-水～100vol%甲醇溶剂依次洗脱，收集含所述化合物的流份；一个流份通过半制备型反相高效液相色谱以30%乙腈-15%甲醇-55%水（vol）的溶剂系统进行分离纯化，得到化合物1和化合物2。另一个流份进行硅胶色谱柱层析，用三氯甲烷-甲醇系统以体积比5:1～1:1进行梯度洗脱，再通过半制备型反相高效液相色谱以40vol%乙腈-水的溶剂系统进行分离纯化，得到化合物3和化合物4；再通过半制备型反相高效液相色谱以37.5vol%乙腈-水的溶剂系统进行分离纯化，得到化合物5和化合物6。

所述步骤（3）中，二氯甲烷-甲醇溶液以体积比100:1、20:1、10:1、5:1、1:1、1:2进行梯度洗脱；乙酸乙酯-甲醇系统以体积比10:1、5:1、2:1、1:1、1:2进行梯度洗脱；再通过ODS填料中压柱色谱进行分离，以5vol%甲醇-水、20vol%甲醇-水、40vol%甲醇-水、60vol%甲醇-水、80vol%甲醇-水、100vol%甲醇溶剂系统依次洗脱，收集含所述化合物的流份。

本发明提供上述六种三萜皂苷类化合物在制备抗炎药物中的应用。