[发明专利]蛋白质的聚乙二醇化修饰方法在审
申请号: | 201310255841.2 | 申请日: | 2013-06-24 |
公开(公告)号: | CN103421079A | 公开(公告)日: | 2013-12-04 |
发明(设计)人: | 黄志锋;牛建楼;李校堃;刘白玲;宋林涛;谢遥遥;朱雁林;施璐 | 申请(专利权)人: | 温州医学院;黄志锋 |
主分类号: | C07K1/113 | 分类号: | C07K1/113;C07K1/04 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 王朋飞 |
地址: | 325035 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 蛋白质 聚乙二醇 修饰 方法 | ||
1.蛋白质的聚乙二醇化修饰方法,其特征在于,其是以疏水层析色谱柱为固相反应载体的蛋白质的聚乙二醇化修饰方法。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,对于疏水性强的蛋白,在高盐状态下将蛋白吸附于疏水层析色谱柱上,以聚乙二醇修饰剂为流动相,反应完成后采用盐离子梯度洗脱获得聚乙二醇修饰的蛋白。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,对于疏水性弱的蛋白,在高盐状态下将聚乙二醇修饰剂吸附于疏水层析色谱柱上,以蛋白溶液为流动相,反应完成后采用盐离子梯度洗脱获得聚乙二醇修饰的蛋白。
4.根据权利要求1-3任一项所述的方法,其特征在于,所述疏水层析色谱柱的填充物质包括HiTrap Butyl FF、HiTrap Octyl FF或HiTrap Phenyl FF。
5.根据权利要求2或3所述的方法,其特征在于,所述聚乙二醇修饰剂包括聚乙二醇-丁醛、聚乙二醇-丙醛或聚乙二醇琥珀酸酯。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,所述聚乙二醇修饰剂的分子量大小为5kDa-40kDa。
7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述聚乙二醇修饰剂的分子量大小为20kDa。
8.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述疏水性强的蛋白包括溶菌酶或α-糜蛋白酶。
9.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述疏水性弱的蛋白包括重组酸性成纤维细胞生长因子或重组碱性成纤维细胞生长因子。
10.根据权利要求1-3任一项所述的方法,其特征在于,所述高盐状态是指将蛋白或聚乙二醇修饰剂溶解于含有2-3M氯化钠的磷酸盐缓冲液中。
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