[发明专利]一种高纯度丹酚酸A的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于医药领域，具体地涉及一种高纯度丹酚酸A的制备方法。

背景技术

丹酚酸A（Salvianic acid A）是丹参中所含的一种水溶性酚酸类化合物，最早是由中国医学科学院药物研究所黎莲娘教授于1984年从丹参中分离得到（Li Lian-Niang，et al.Planta Medica.1984，50：227）。近年来，大量的药理试验表明丹酚酸A具有较强的心肌缺血保护（杜冠华，等.药学学报.1995，30(10)：731；Wang Shou-Bao，et al.Eur.J.Pharmacol.2009，615：125）、抗血栓（刘颖琳，等.药学学报.2002，37(2)：81；Fan Hu a-Ying，et al.Thromb.Res.2010，126：e17；Huang Z S，et al.J.Thromb.Haemost.2010，8：1383）、神经保护（杜冠华，等.药学学报.1995，30(3)：184；Wang XJ，et al.Neurosci.Res.2005，51：129）、抗肝纤维化（刘成，等.世界华人消化杂志.1999，7(7)：570；Lin Yun-Lian，et al.J.Pharm.Pharmacol.2006，58：933）和防治糖尿病及并发症（杜冠华，等.药学学报，1995，30(8)：561）等药理活性。

相比较丹参中其它水溶性酚酸类成份，如丹参素、迷迭香酸、丹酚酸B等在药材中有较高含量和提取分离相对容易等特点，不同产地的丹参药材中丹酚酸A的含量仅约为万分子一到万分之三，且提取分离步骤复杂，生产得率低，故多年以来科研工作者一直致力于找到一种高效的制备高纯度丹酚酸A的方法。如中国专利申请CN1397276、CN1513848、CN1830947A、CN1887849A、CN101480423A中均涉及丹酚酸A的制备，但上述这些专利中的制备方法，存在工艺流程复杂，生产成本高，不适合工业化生产或制备纯度达不到原料药的要求等不足。

发明内容

为了克服现有技术中存在的不足，本申请人对丹酚酸A的制备工艺进行了大量的研究，同时对不同制备工艺做了细致的分析和详尽的比较，从而提供了一种高纯度丹酚酸A的制备工艺，利用该工艺制备得到的丹酚酸A的纯度可以达到95.0%以上，可直接作为注射用原料药。

本发明提供了一种高纯度丹酚酸A的制备方法，包括以下步骤：

以丹酚酸B提取物或丹参多酚酸盐为原料，加水溶解，加柠檬酸调节pH值至3.0-3.4；置于密闭容器内，135-140℃温度，加热4-5小时或加入酶促反应剂鞣酶、苦杏仁酶，30-80℃温度，加热5-48小时得到丹酚酸A溶液，冷却后溶液调pH值至2-3，经非极性或弱极性大孔树脂柱层析分离，收集洗脱液，回收乙醇至尽，干燥；再经硅胶柱层析，收集含量大于95.0%的丹酚酸A部分，回收溶剂，干燥，即得。

在推荐的实施例中，所述的丹酚酸B提取物的含量为80-100%。

在推荐的实施例中，所述的非极性或弱极性大孔树脂选自D101、HPD826、CG161中的一种。所述的非极性或弱极性大孔树脂进一步优选CG161。

在推荐的实施例中，所述的低极性有机溶剂体系选自正己烷-乙酸乙酯、石油醚-乙酸乙酯、环己烷-乙酸乙酯、正己烷-叔丁基甲基醚、石油醚-叔丁基甲基醚体系中的一种。所述的低极性有机溶剂体系进一步优选正己烷-乙酸乙酯。

在推荐的实施例中，所述的干燥方法为50℃减压干燥。

丹参多酚酸盐是从丹参中提取的有效部位，含丹参乙酸镁80-90%，用于制备注射用丹参多酚酸盐。

本发明取得的有益技术效果有：

1.丹酚酸A是有机酸，电离常数pKa=3.14，其分子状态随溶液的pH变化而变化；当溶液的pH<3.14时，丹酚酸A主要以分子形式存在，在水中的溶解度低；当pH>3.14时，丹酚酸A主要以离子状态存在，在水中的溶解度大；试验证明：丹酚酸A在pH值1.5～3.5稳定。当PH值在1.5～3.5时溶液浑浊，此时，丹酚酸A以分子状态存在（电离常数pKa=3.14）而致使溶解度降低析出，这有助于降解反应向正方向进行；同时丹酚酸A形成分子以固态存在后稳定性会增加，丹酚酸A的转化率提高。

2.试验证明：鞣酶、苦杏仁酶可以催化丹酚酸B向丹酚酸A的转化，相比于加热转化方法，本法温度低、常压下即可进行反应，但反应时间相对延长。

3.本发明的制备工艺流程简单、操作方便，而且生产成本低、便于工业化生产。