[发明专利]一种从蛙科动物中提取半乳糖凝聚素-3的方法及其制剂

权利要求书

1. 一种从蛙科动物中提取半乳糖凝聚素-3的方法，其特征在于包括以下步骤：

1）将蛙科动物用清水冲洗干净，将其在﹣7℃-0℃冰浴温度下冬眠处理后处死解剖，分别取皮肤、脑、肺、肾、输卵管、脾、胰部位剪成小块投入液氮中冷冻3-8h，备用；

2）将冷冻后的皮肤、脑、肺、肾、输卵管、脾、胰小块研磨处理30-50mim使细胞破碎释出蛋白质，再超声处理2-5min，再将组织液11000-13000rpm、3-6℃离心4-7min，去除沉淀；

3）将过滤后的上清液加入2-3倍的硫酸铵，不断搅拌使析出沉淀，再次11000-13000rpm、3-6℃离心4-7min，过滤，收集沉淀，将沉淀加等重量的水溶解均匀；

4）最后所得溶液经过透析去除先前所加的硫酸铵，即得半乳糖凝聚素-3液，冰箱冷藏保存。

2. 如权利要求1所述的一种从蛙科动物中提取半乳糖凝聚素-3的方法，其特征在于：所述的蛙科动物为野生棘胸蛙、中华蟾蜍、黑斑蛙、泽蛙、金线蛙、牛蛙、树蛙、虎纹蛙或雨蛙。

3. 如权利要求1所述的一种从蛙科动物中提取半乳糖凝聚素-3的方法，其特征在于步骤2）中：研磨处理时间为30-50mim，超声处理时间为3-4min；离心转速为12000-12500rpm，温度为4-5℃，离心时间5-6min。

4. 如权利要求1所述的一种从蛙科动物中提取半乳糖凝聚素-3的方法，其特征在于步骤3）中：离心转速为12000-12500rpm，温度为4-5℃，离心时间5-6min。

5. 如权利要求1所述的含半乳糖凝聚素-3的抗肿瘤生物制剂，其特征在于：半乳糖凝聚素-3液的重量含量为65-85%，白芨提取物的重量含量为5-15%，蒸馏水的重量含量为10-20%；

所述的白芨提取物采用下述方法制成：将白芨粉碎成500目细粉，再分别加入两倍原料重量的蒸馏水在100-120度温度下蒸煮、搅拌30-45min，再用三层纱布滤除剩余的渣，然后将所得提取液真空浓缩，于150-170℃烘干成白芨提取物。

6. 如权利要求5所述的含半乳糖凝聚素-3的抗肿瘤生物制剂，其特征在于：半乳糖凝聚素-3液的重量含量为70-82%，优选75-80%。

7. 如权利要求5所述的含半乳糖凝聚素-3的抗肿瘤生物制剂，其特征在于：白芨提取物的重量含量为6-12%，优选9-10%。

8. 如权利要求5所述的含半乳糖凝聚素-3的抗肿瘤生物制剂，其特征在于：蒸馏水的重量含量为12-18%，优选14-16%。