[发明专利]N-[(2S,3R)-4-苯基-3-苄基-3-苄氧甲酰氨基-2-羟基丁酰]-L-亮氨酸苄酯的晶型及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及药物化学领域，具体涉及一种具有免疫调节功能的抗癌药物乌苯美司的关键中间体N-[(2S，3R)-4-苯基-3-苄基-3-苄氧甲酰氨基-2-羟基丁酰]-L-亮氨酸苄酯的晶型及其制备方法。 

背景技术

乌苯美司是从橄榄网状链霉菌的培养液中分离而得的一种低分子二肽化合物，它具有抑制肿瘤细胞表面氨基肽酶B、N和亮氨酸氨基肽酶作用，诱导肿瘤细胞凋亡和促进宿主细胞免疫功能，增强抗癌作用的双重功能。乌苯美司在临床上常和其他化疗药物联合应用于急性髓性的白血病、慢性髓性的白血病、肺鳞癌、恶性黑色素瘤、胃瘤等的治疗；和放疗联合，用于鼻咽癌等肿瘤疾病的治疗，还用于各种因素引起的免疫功能低下者，试用于骨髓发育不良综合症及单纯红细胞再生不良症的治疗。各种临床结果反馈该药物在增强人体免疫能力方面具有显著疗效，乌苯美司能显著提高癌症患者的生存率，改善其生活质量。 

最早合成乌苯美司的方法是生物化学的细菌发酵方法，由Umezawa H等公开于J.Antibiot.1976，29，97。随着全球对乌苯美司需求不断增加，仅通过发酵生产乌苯美司已经不能满足药品市场的需求，而利用化学合成的方法更有利于工业化生产，越来越多的化学合成方法被报道。N-[(2S，3R)-4-苯基-3-苄基-3-苄氧甲酰氨基-2-羟基丁酰]-L-亮氨酸苄酯(式I)是化学合成方法生产具有免疫调节功能的抗癌药物乌苯美司的关键中间体，该中间体经氢化反应后得到乌苯美司(式II)。N-[(2S，3R)-4-苯基-3-苄基-3-苄氧甲酰氨基-2-羟基丁酰]-L-亮氨酸苄酯结构中有手性中心，手性化合物合成的复杂性会导致的产物中含有杂质，影响下一步反应产物乌苯美司的纯度，而且作为关键中间体，其存贮的稳定性也会影响下一步反应产物的品质，因此N-[(2S，3R)-4-苯基-3-苄基-3-苄氧甲酰氨基-2-羟基丁酰]-L-亮氨酸苄酯的纯度和稳定性会影响最终产物乌苯美司作为原料药应用于药物制剂的安全性。 

专利CN101891647A公布了该化合物的优化工艺，用溶剂析晶的方法提纯粗品，但未进行晶型研究，且该专利公开的纯化方法为采用甲基叔丁基醚或石油醚对产品进行浆洗，因为乌苯美司在上述两种溶剂中溶解度小，采用浆洗过滤的方式除去杂质，达到纯化的目的。实验证明利用上述方法纯化所得产物的纯度仅约为90％，总杂近10％，这样会加大后续合成制备成品乌苯美司时的纯化难度以及增大杂质超限的风险。若采用过柱法纯化，操作繁琐，生产周期长，对设备要求高，不适合工业化生产。结晶态化合物具有稳定性好和纯度高等特点，有必要对重结晶纯化方法和该化合物的晶型进行研究，以得到有利于生产高质量终产品乌苯美司原料药的中间体N-[(2S，3R)-4-苯基-3-苄基-3-苄氧甲酰氨基-2-羟基丁酰]-L-亮氨酸苄酯。 

发明内容

本发明的目的是提供一种乌苯美司中间体N-[(2S，3R)-4-苯基-3-苄基-3-苄氧甲酰氨基-2-羟基丁酰]-L-亮氨酸苄酯的晶型，该晶型的乌苯美司中间体纯度高，稳定性好，适合进一步制备高纯度的乌苯美司原料药。 

本发明提供的N-[(2S，3R)-4-苯基-3-苄基-3-苄氧甲酰氨基-2-羟基丁酰]-L-亮氨酸苄酯的晶型，其特征在于，使用Cu-Ka辐射，以2θ角表示的粉末X射线衍射在7.080±0.2，7.920±0.2，8.700±0.2，12.597±0.2，16.379±0.2，17.201±0.2，17.580±0.2，19.620±0.2，20.380±0.2，20.980±0.2，22.399±0.2，22.941±0.2，23.421±0.2，23.960±0.2，24.921±0.2，25.540±0.2，26.460±0.2有峰。 

进一步表示所述晶型，使用CuKa辐射，以2θ角、晶面间距d、相对高度表达的粉末X射线衍射图谱如下表所示： 

更进一步表示该晶型，使用CuKa辐射，其粉末X射线衍射图如附图1所示。 

本发明另一个目的是提供上述乌苯美司中间体N-[(2S，3R)-4-苯基-3-苄基-3-苄氧甲酰氨基-2-羟基丁酰]-L-亮氨酸苄酯晶型的制备方法，其特征在于采用有机溶剂重结晶的方法制备，所述有机溶剂选自乙醇、甲醇、四氢呋喃、丙酮、异丙醇、乙酸乙酯、二氯甲烷、甲基叔丁基醚、正己烷、石油醚中的一种或几种，优选乙醇、甲醇、四氢呋喃、丙酮、乙酸乙酯其中一种，特别优选乙酸乙酯作为重结晶溶剂。