[发明专利]一种斑马鱼类过敏检测模型的建立及其应用

权利要求书

1.一种斑马鱼类过敏检测模型的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)Tryptase检测底物BAPNA的反应浓度的确定，选择30mg/ml作为Tryptase检测底物BAPNA的最佳反应浓度；

(2)斑马鱼的发育阶段的确定，选择受精后3天的斑马鱼作为最佳发育阶段；

(3)检测用斑马鱼数量的确定，选择2尾作为最佳的斑马鱼数量；

(4)阳性对照化合物Compoud48/80的浓度的确定，选择100μg/ml作为阳性对照化合物Compoud48/80的最佳浓度。

2.如权利要求1所述的斑马鱼类过敏检测模型的构建方法，其特征在于，还包括以下步骤：(5)微孔板分析，将斑马鱼放入96孔板，然后将微孔板置于多功能微孔板分析仪下检测OD405的值。

3.一种如权利要求1或2所述的斑马鱼类过敏检测模型的构建方法在评价溶解给药的注射剂致敏性中的应用。

4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，构建的斑马鱼类过敏检测模型按如下步骤评价溶解给药的注射剂致敏性：设置多个实验组：3个化合物处理组，1个模型组，1个溶剂组，1个阳性对照组；化合物以溶解的方式给药；所有的实验组含有相同的浓度为30mg/ml的BAPNA；于28℃恒温培养箱中培养24小时；使用多功能酶标仪检测各实验组OD450的值；统计学处理结果以表示，多组间比较采用单因子方差分析，两组间比较采用Dunnett’sT-检验进行统计学处理，p<0.05为差异性显著。

5.一种如权利要求1或2所述的斑马鱼类过敏检测模型的构建方法在评价血管注射给药的注射剂致敏性中的应用。

6.如权利要求5所述的应用，其特征在于，构建的斑马鱼类过敏检测模型按如下步骤评价血管注射给药的注射剂致敏性：设置多个实验组：1个化合物处理组，1个模型组，1个溶剂组，1个阳性对照组；化合物以血管显微注射的方式给药；所有的实验组含有相同的浓度为30mg/ml的BAPNA；于28℃恒温培养箱中培养24小时；使用多功能酶标仪检测各实验组OD450的值；统计学处理结果以表示，多组间比较采用单因子方差分析，两组间比较采用Dunnett’s T-检验进行统计学处理，p<0.05为差异性显著。