[发明专利]用金属有机配合物对双氧水进行比色检测的方法

说明书

技术领域

本发明属于生物医学检测领域，涉及一种用金属有机配合物对双氧水进行比色检测的方法。

背景技术

双氧水具有强烈的氧化性，可以作为氧化剂和漂白剂使用。近年来，部分食品生产企业将双氧水作为食品添加剂，对食品进行氧化处理，从而提高食品的外观并消除已变质食品的异味，但双氧水的使用会对消费者的身体健康产生严重的危害。因此，对食品中双氧水含量的检测对于食品质量监督以及消费者健康权益保障都具有重要的意义。此外，双氧水还是人体中酶反应的代谢产物之一。通过对双氧水的检测可以间接的实现对人体中生物酶的活性以及酶反应底物浓度的检测，因此在血液中双氧水的检测在医学检测领域也具有重要的应用价值。

双氧水的检测方法主要是电化学方法。该方法通过在电极表面固定具有催化双氧水电化学还原能力的催化剂（普鲁士蓝、铂纳米粒子、钯纳米粒子等），实现对双氧水的电化学催化还原检测。虽然该方法灵敏度高、技术成熟，但是使用成本高、需要配置电化学检测仪器。显色反应是一种低成本、直观的检测方法，是分析检测方法发展的一个重要方向。最近，中国发明专利（200810051040.3）报道了用一种用四氧化三铁作为模拟酶进行双氧水比色检测的方法。四氧化三铁作为模拟酶具有动力学缓慢的缺点，因此检测过程耗时。贵金属纳米材料，如铂及铂的合金，虽然可以做为模拟酶实现对双氧水的比色检测，但是成本相对较高，不适合推广。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种快速、准确、低成本的用金属有机配合物对双氧水进行比色检测的方法。

本发明的技术方案概述如下：

一种用金属有机配合物对双氧水进行比色检测的方法，包括如下步骤：

（1）配制浓度为1μM～饱和的可变价金属的无机盐溶液为溶液Ⅰ；

（2）配制浓度为1μM～饱和的2-甲基咪唑溶液为溶液Ⅱ或浓度为1μM～饱和的4,4’-联吡啶溶液为溶液Ⅱ；

所述溶液Ⅰ和溶液Ⅱ的溶剂为水、甲醇或乙醇；

（3）将溶液Ⅰ和溶液Ⅱ按体积比为1:100～100:1的比例混合，制成金属有机配合物溶液；

（4）将2～100微升浓度为50毫摩尔/升的过氧化物酶色源底物的二甲基亚砜溶液、10～100微升所述金属有机配合物溶液与200微升待测双氧水样品混合，用0.2M pH值为2～4的缓冲溶液稀释至1毫升，得到溶液A，静置5～30分钟后，测定溶液A在可见光区的吸光光度值，比色检测出双氧水的浓度。

另一种用金属有机配合物对双氧水进行比色检测的方法，包括如下步骤：

（1）配制浓度为1μM～饱和的可变价金属的无机盐溶液为溶液Ⅰ；

（2）配制浓度为1μM～饱和的2-甲基咪唑溶液为溶液Ⅱ或浓度为1μM～饱和的4,4’-联吡啶溶液为溶液Ⅱ；

所述溶液Ⅰ和溶液Ⅱ的溶剂为水、甲醇或乙醇；

（3）将溶液Ⅰ和溶液Ⅱ按体积比为1:100～100:1的比例混合，制成金属有机配合物溶液；

（4）用下述两种方法之一种制备金属有机配合物薄膜：

方法一：将步骤（3）获得的金属有机配合物溶液中的所述金属有机配合物收集、烘干、压制成膜；

方法二：在固体基底材料表面原位生长金属有机配合物薄膜，步骤为：

a将固体基底材料浸泡于0.1～2mg/mL聚乙烯吡咯烷酮水溶液中1分钟～1天，使所述固体基底材料表面吸附聚乙烯吡咯烷酮分子；

b将步骤a制备的材料反复依次浸泡于所述步骤（1）获得的溶液I中1分钟～1小时和步骤（2）获得的溶液II中1分钟～1小时；在固体基底材料表面原位生长出金属有机配合物薄膜，直到金属有机配合物薄膜的厚度为0.5～10μm为止；

（5）将2～100微升浓度为50毫摩尔/升的过氧化物酶色源底物的二甲基亚砜溶液加入到200微升待测双氧水样品中，用0.2M pH值为2～4的缓冲溶液稀释至1毫升，得溶液B；

（6）取1～100微升溶液B滴在所述金属有机配合物薄膜表面，放置5～15分钟，观察液滴颜色，比色检测出双氧水的浓度。

可变价金属优选的是铁、铜、金或银。

无机盐优选盐酸盐、硫酸盐或硝酸盐；

过氧化物酶色源底物优选3,3'，5,5'-四甲基联苯胺或2,2’-连氮基-双-(3-乙基苯并二氢噻唑啉-6-磺酸)二铵盐。

0.2M pH值为2～4的缓冲溶液优选磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液，柠檬酸–氢氧化钠-盐酸缓冲液，柠檬酸–柠檬酸钠缓冲液或乙酸–乙酸钠缓冲液。