[发明专利]两亲性三嵌段聚多肽载ICG胶束及其制备方法

说明书

【技术领域】

本发明属于纳米材料的技术领域，特别涉及一种两亲性三嵌段聚多肽载ICG胶束及其制备方法。

【背景技术】

吲哚菁绿(ICG)是一种功能性的染料分子，具有一系列独特的光物理、光化学和光生物学特性，是美国FDA批准的唯一的具有近红外特性的光学诊断因子，同时也是一种理想的光吸收剂，可以用于进行激光介导的光热治疗。这种近红外的染料可以作为一种理想的对比剂用于发展集光学成像和光热治疗于一体的双功能靶向探针。目前，吲哚菁绿的应用受到极大的限制，因为它本身所具有的缺陷性，包括浓度依赖的聚集，较差的分子稳定性，与蛋白的非特异性结合以及缺少靶向特异性。因此，科研人员为改善其性能使其能够用于荧光标记进行了大量的研究。

专利申请201010607708.5公开了一种荧光纳米探针及其制备方法”，通过形成核壳结构将吲哚菁绿包裹在聚乙交酯丙交酯中，可以有效避免吲哚菁绿发生聚集而分解，稳定性增强，但是因为缺乏靶向特异性，限制了其在人体内的应用。Kirchherr等(Kirchherr A K,et al.Stabilization of Indocyanine Green by Encapsulation within MIicellar Systems[J].Molecular pharmaceutics，2009，6(2)：480-491.)将ICG包裹在胶束体系中制备了在极性溶剂中低聚集、量子产率是原来3倍的ICG胶束；Cuifang Zheng等(Cuifang Zheng,et al.Indocyanine green-loaded biodegradable tumor targeting nanoprobes for in vitro and in vivo imaging.Biomaterials,2012,33:5603-5609)把ICG包埋在接了叶酸靶向的聚乙交酯丙交酯磷脂球中制备了粒径在100nm左右的纳米探针，该纳米颗粒的光学特性和溶液稳定性得到提高，并且具有主动靶向性；Mingbin Zheng等(Mingbin Zheng,et al.Single-Step Assembly of DOX/ICG Loaded Lipid_Polymer Nanoparticles for Highly Effective Chemo-photothermal Combination Therapy.ACS Nano,2013,3,2056–2067)将ICG和抗癌药阿霉素包裹在聚乳酸乙醇酸的卵磷脂颗粒中，提供了一种可进行人体内荧光成像和肿瘤的化学-光热协同疗法的纳米体系。但是，尚未有基于天然的或非天然的氨基酸类的聚多肽高分子聚合物材料应用在生物可降解的胶束释药体系中的报道。

【发明内容】

本发明的首要目的在于克服现有技术存在的缺点和不足，提供一种两亲性三嵌段聚多肽载ICG胶束。该胶束具有良好的生物相容性和可生物降解性，性质稳定，可应用于光学成像和光热治疗。

本发明的另一目的在于提供所述的两亲性三嵌段聚多肽载ICG胶束的制备方法。

本发明的目的通过以下技术方案实现：一种两亲性三嵌段聚多肽载ICG胶束，包括聚亮氨酸形成的内核、环绕所述内核的由聚赖氨酸形成的中间层及部分穿插于所述中间层的由聚乙二醇形成的外壳，其中，所述内核中分散有吲哚菁绿。

所述的两亲性三嵌段聚多肽载ICG胶束的直径优选为100～160nm。

所述的两亲性三嵌段聚多肽载ICG胶束的制备方法，包括如下步骤：将聚乙二醇-b-聚赖氨酸-b-聚亮氨酸三嵌段杂化聚多肽（PEG-PLL-PLLeu）和吲哚青绿（ICG）按质量比100:1～1:1混合均匀，加入有机溶剂，使吲哚青绿的浓度为0.01～10mg/mL，于20～25℃、1000～1500rpm震荡3～5h，得到混合溶液；将混合溶液进行透析，得到两亲性三嵌段聚多肽载ICG胶束；

所述的聚乙二醇-b-聚赖氨酸-b-聚亮氨酸三嵌段杂化聚多肽和吲哚青绿的质量比优选为5:1；

所述的聚乙二醇-b-聚赖氨酸-b-聚亮氨酸三嵌段杂化聚多肽（PEG-PLL-PLLeu）优选采用以下方法进行制备：

（1）MPEG-b-PZLL的合成：将MPEG-NH₂和赖氨酸酸酐按摩尔比1:15～1:30、于28～32℃搅拌反应60～80h后离心，取沉淀，真空干燥，得到MPEG-b-PZLL；合成方程式如下：

MPEG-b-PZLL的合成