[发明专利]一种层层自组装法双重修饰脂质体的制备方法

权利要求书

1.一种层层自组装法双重修饰脂质体的制备方法，其特征在于：

（1）各原料的重量百分比为：卵磷脂为4.0%-8.0%，胆固醇为0.8%-1.2%，吐温-80为1.5%-2.5%，维生素E为0.1%-0.3%，其余的是浓度为0.05M的磷酸盐缓冲溶液即PBS，为86.0%-93.1%，此外使用的壳聚糖和海藻酸钠溶液浓度分别为0.6%，0.5%；

（2）按上述重量百分比称取卵磷脂、胆固醇、吐温-80和维生素E，在40℃条件下，先用0.206g卵磷脂溶于10ml无水乙醇后，完全溶解各组分；

（3）将步骤（2）中所得溶液于真空旋转蒸发仪上除去无水乙醇，形成均匀薄膜；

（4） 按8%脂质浓度即卵磷脂与胆固醇总量占缓冲溶液体积的百分比，加入30mlpH7.4、0.05M的磷酸盐缓冲溶液即PBS洗膜，形成粗脂质体悬浊液；

（5）用动态高压微射流即DHPM处理步骤（4）得到的粗脂质体悬浊液，压力为120MPa，处理次数为2次，得纳米脂质体；

（6）将步骤（5）得到的纳米脂质体按照体积比1：1，逐滴加入至0.6%的壳聚糖即CH溶液中，利用HCl、NaOH稀溶液调节pH至5.5，室温搅拌1h后静置1h，得到第一层修饰的壳聚糖-脂质体即CH-L；

（7）将步骤（6）得到的CH-L按照体积比1:1逐滴加入到0.5%的海藻酸钠即AL溶液中，利用HCl、NaOH稀溶液调节pH至5.5，室温搅拌1h后静置1h，3000g离心15min除去沉淀，过滤得到双重修饰的海藻酸钠-壳聚糖-脂质体即AL-CH-L。