[发明专利]以改性聚氯乙烯为载体的高活力固定化蛋白酶的制备方法

权利要求书

1.以改性聚氯乙烯为载体制备高活力固定化蛋白酶的方法，其特征在于，方法如下：

步骤a：将聚氯乙烯粉末和体积分数为3%~5%的乙二胺溶液，按质量体积比1﹕20，加入恒温搅拌反应器中，反应器温度为50~80℃，搅拌反应90min；反应结束后以蒸馏水洗涤，去除多余的乙二胺，30~50℃恒温干燥获得胺化聚氯乙烯粉末；

步骤b：将步骤a所得的胺化聚氯乙烯粉末和体积分数为2%~3%的戊二醛溶液，按质量体积比1﹕30，加入恒温搅拌反应器中，在50℃下搅拌反应45min；反应结束后以蒸馏水洗涤，去除多余的戊二醛，得已活化的胺化聚氯乙烯；

步骤c：用pH=7的低盐缓冲液和混合蛋白酶粉配制混合蛋白酶酶液，质量体积比为2~3mg/mL；

步骤d：将步骤b所得的已活化的胺化聚氯乙烯和步骤c所得的混合蛋白酶酶液，按质量体积比1﹕10，加入恒温搅拌反应器中；设置反应器温度为15~25℃，搅拌反应60~90min；搅拌反应完成后，4℃恒温放置6h；用蒸馏水和pH=7.0低盐缓冲液各洗涤固定化蛋白酶1遍；真空冷冻干燥12h获得固定化混合蛋白酶粉末。

2.根据权利要求1所述的以改性聚氯乙烯为载体制备高活力固定化蛋白酶的方法，其特征在于：所述的活化步骤（即步骤b）中的戊二醛溶液pH范围为6.0~8.0。

3.根据权利要求1所述的以改性聚氯乙烯为载体制备高活力固定化蛋白酶的方法，其特征在于：所述的混合蛋白酶粉为胰蛋白酶酶粉和糜蛋白酶酶粉的混合物，其混合比例以两者所含酶活性计，胰蛋白酶﹕糜蛋白酶总活性比为2400﹕600。