[发明专利]一种体外构建三维立体组织的方法无效
| 申请号： | 201310291478.X | 申请日： | 2013-07-11 |
| 公开（公告）号： | CN104274864A | 公开（公告）日： | 2015-01-14 |
| 发明（设计）人： | 徐月敏;吕向国;冯超 | 申请（专利权）人： | 上海市第六人民医院 |
| 主分类号： | A61L27/38 | 分类号： | A61L27/38;A61L27/36 |
| 代理公司： | 上海精晟知识产权代理有限公司 31253 | 代理人： | 冯子玲 |
| 地址： | 200233 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 体外 构建 三维立体 组织 方法 | ||
1.一种体外构建三维立体组织的方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤1，分离培养上皮细胞和肌细胞；
步骤2，将小肠黏膜下层脱细胞基质支架置入肌细胞悬液中，震荡复合完成后，继续培养；
步骤3，将上皮细胞悬液滴在经步骤2处理得到后的支架的肌细胞层上，继续培养得到三维立体组织。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述肌细胞为骨骼肌细胞；所述上皮细胞为舌上皮细胞。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述三维立体组织为三维立体尿道组织。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2中的震荡复合在恒温震荡箱内进行，温度为25-40℃，速度为50-150rpm/min，持续震荡6-24h。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2中所述肌细胞悬液由步骤1得到的肌细胞消化调整密度为（0.5-5）×107/mL得到；步骤3中所述上皮细胞悬液由步骤1得到的上皮细胞消化调整密度为（0.2-3）×106/mL得到。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2中继续培养时间为2-6d，每天换液；步骤3中继续培养时间为2-6d，每天换液。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2中所述小肠黏膜下层脱细胞基质支架在使用前先进行消毒处理。
8.一种如权利要求1所述的方法构建的三维立体组织。
9.根据权利要求8所述的三维立体组织，其特征在于，所述三维立体组织为三维立体尿道组织。
10.权利要求8所述三维立体组织在尿道组织工程中的应用。
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