[发明专利]用于绵羊痘病毒检测的E3蛋白及其高免血清无效
申请号: | 201310293606.4 | 申请日: | 2013-07-15 |
公开(公告)号: | CN103320460A | 公开(公告)日: | 2013-09-25 |
发明(设计)人: | 张强;于少雄;颜新敏;赵志荀;吴国华;岳华;李应国;张光培;聂福平;周晓黎;芦晓立;李健;朱海霞;卢昌 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院兰州兽医研究所 |
主分类号: | C12N15/70 | 分类号: | C12N15/70;G01N33/68;C07K16/08;C07K16/06;G01N33/569 |
代理公司: | 兰州振华专利代理有限责任公司 62102 | 代理人: | 张晋 |
地址: | 730046 甘肃*** | 国省代码: | 甘肃;62 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 绵羊 痘病毒 检测 e3 蛋白 及其 血清 | ||
1. 一种重组E3蛋白的制备方法,其特征在于分别采用SEQ ID 1和SEQ ID 2的序列为上下游引物,以绵羊痘病毒基因组DNA为模板进行PCR扩增获得SPPV E3L基因,与pMD18-T simple载体连接后,再将连接产物转化至DH5α感受态细胞,提取质粒并测序,将测序正确的重组质粒命名为pMD18-T-SPPV E3L。
2.将SPPV E3L基因亚克隆至原核表达载体pGEX4T-1中,重组质粒命名为pGEX4T-1-SPPV E3L,再将重组质粒转化至BL21(DE3)plysS感受态细胞中,以IPTG为诱导剂对重组菌进行诱导表达,得到重组E3蛋白。
3. 权利要求1所述的方法制备的重组E3蛋白。
4. 权利要求2所述的重组E3蛋白在绵羊痘病毒检测中的应用。
5. 权利要求2所述的重组E3蛋白在制备绵羊痘病毒检测试剂或试剂盒中的应用。
6. 绵羊痘病毒检测用的免疫血清的制备方法,其特征在于用权利要求2所述的重组E3蛋白对小鼠进行免疫后,采取二免血样分离血清。
7. 权利要求5所述的方法制备的绵羊痘病毒检测用的免疫血清。
8. 权利要求6所述的绵羊痘病毒检测用的免疫血清在绵羊痘病毒检测中的应用。
9. 权利要求6所述的绵羊痘病毒检测用的免疫血清在制备绵羊痘病毒检测试剂或试剂盒中的应用。
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