[发明专利]一种热稳定性改良的木聚糖酶XynAS9-m突变体V81P/G82E及其基因和应用有效
申请号: | 201310298293.1 | 申请日: | 2013-07-16 |
公开(公告)号: | CN103343113A | 公开(公告)日: | 2013-10-09 |
发明(设计)人: | 姚斌;罗会颖;王坤;王亚茹;孟昆;石鹏君;黄火清;柏映国;杨培龙;赵珩;马锐 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院饲料研究所 |
主分类号: | C12N9/42 | 分类号: | C12N9/42;C12N15/56;C12N15/81;C12N1/19;C12R1/84 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 热稳定性 改良 聚糖 xynas9 突变体 v81p g82e 及其 基因 应用 | ||
1.一种木聚糖酶XynAS9-m突变体V81P/G82E,其特征在于,将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的木聚糖酶的第81位缬氨酸突变为脯氨酸,且第82位甘氨酸突变为谷氨酸。
2.一种木聚糖酶XynAS9-m突变体V81P/G82E/D185P/S186E,其特征在于,将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的木聚糖酶的第81位缬氨酸突变为脯氨酸且第82位甘氨酸突变为谷氨酸;第185位的天冬氨酸突变为脯氨酸且第186位的丝氨酸突变为谷氨酸。
3.一种木聚糖酶突变体基因,其特征在于,其编码权利要求1所述的木聚糖酶XynAS9-m突变体V81P/G82E或权利要求2所述的木聚糖酶XynAS9-m突变体V81P/G82E/D185P/S186E。
4.根据权利要求3所述的木聚糖酶突变体基因,其特征在于,所述基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.5或6所示。
5.包含权利要求3所述木聚糖酶突变体基因的重组载体。
6.包含权利要求3所述木聚糖酶突变体基因的重组菌株。
7.根据权利要求6所述的重组菌株,其特征在于,所述重组菌株为毕赤酵母。
8.一种制备稳定性改良的木聚糖酶XynAS9-m的方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)用权利要求5的重组载体转化宿主细胞,得重组菌株;
2)培养重组菌株,诱导重组定点突变的木聚糖酶XynAS9-m的表达;以及
3)回收并纯化所表达的定点突变的木聚糖酶XynAS9-m。
9.权利要求1所述的木聚糖酶XynAS9-m突变体V81P/G82E的应用。
10.权利要求2所述的木聚糖酶XynAS9-m突变体V81P/G82E/D185P/S186E的应用。
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