[发明专利]核糖体蛋白类似物RPL22L1的反义核苷酸序列在制备抑制卵巢癌细胞生长药物中的应用

权利要求书

1.核糖体蛋白类似物RPL22L1的反义核苷酸序列在制备抑制卵巢癌细胞生长药物中的应用。

2.如权利要求1所述的应用，其特征在于所述的核糖体蛋白类似物RPL22L1的反义核苷酸序列如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.3所示。

3.核糖体蛋白类似物RPL22L1的反义核苷酸序列，其特征在于所述的核糖体蛋白类似物RPL22L1的反义核苷酸序列如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2或SEQ IDNO.3所示。

4.一种表达载体，其特征在于含有权利要求3所述的核苷酸序列。

5.如权利要求4所述的表达载体，其特征在于所述的表达载体是以载体pSUPER.retro.puro为基础载体构建得到的。

6.如权利要求5所述的表达载体，其特征在于所述的表达载体是通过以下方法构建得到的：

（1）合成以下含有核糖体蛋白类似物RPL22L1的反义核苷酸序列的寡核苷酸序列：

hRPL22L1-SiR+:GATCCCCAAGAAATACCTTAAGAAGAACTTCAAGAGAGTTCTTCTTAAGGTATTTCTTTTTTTA

hRPL22L1-SiR-:AGCTTAAAAAAAGAAATACCTTAAGAAGAACTCTCTTGAAGTTCTTCTTAAGGTATTTCTTGGG；

或

hRPL22L1-SiR+:GATCCCCAAAATCTTTTATGTACTCAGGTTCAAGAGACCTGAGTACATAAAAGATTTT TTTTTA

hRPL22L1-SiR-:AGCTTAAAAAAAAATCTTTTATGTACTCAGGTCTCTTGAACCTGAGTACATAAAAGATTTT GGG；

或

hRPL22L1-SiR+:GATCCCCAAAGTGCTGATTATAGCTGTGTTCAAGAGACACAGCTATAATCAGCACTTT TTTTTA

hRPL22L1-SiR-:AGCTTAAAAAAAAGTGCTGATTATAGCTGTGTCTCTTGAACACAGCTATAATCAGCACTTT GGG；

（2）寡核苷酸退火：

反应条件：95℃5min；80℃10min；70℃10min；60℃10min；50℃10min；37℃10min；获得含有核糖体蛋白类似物RPL22L1的反义核苷酸序列的寡核苷酸片段；

（3）pSUPER.retro.puro载体线性化：

用BglⅡ、HindⅢ两种内切酶对pSUPER.retro.puro进行双酶切，获得线性质粒载体；

（4）步骤（2）得到的寡核苷酸片段与线性化的表达质粒pSUPER.retro.puro连接重组，获得pSUPER-shRNA-RPL22L1重组质粒；

（5）pSUPER-shRNA-RPL22L1重组质粒的转化至感受态DH5a细胞中，涂于含氨苄平板培养基上培养后挑取阳性菌落摇菌培养，提取pSUPER-shRNA-RPL22L1重组质粒DNA，即得。

7.一种宿主细胞，其特征在于含有权利要求4-6任一项所述的表达载体。

8.权利要求4-6任一项所述的表达载体在制备抑制卵巢癌细胞生长药物中的应用。