[发明专利]稻米的ɑ-淀粉酶抑制剂和ɑ-球蛋白混合物的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及稻米蛋白的制备领域，具体涉及一种稻米的ɑ-淀粉酶抑制剂和ɑ-球蛋白混合物的制备方法。

背景技术

稻米蛋白主要可分为清蛋白（Albumin）、球蛋白（Globulin）、醇溶蛋白（Prolamin）和谷蛋白（Glutelin），其中，球蛋白能溶于稀盐溶液又称盐溶蛋白，是稻米蛋白中的主要生理活性蛋白。通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE)图谱显示，稻米盐溶蛋白可分为分子量大小不同的两个主要区带，其中，26kDa～28kDa蛋白区带，包括了主要的球蛋白即ɑ-球蛋白；而另一个10kDa～18kDa蛋白区带，是可溶性最大的球蛋白组分，主要包括了部分醇溶蛋白和过敏蛋白。Tong等研究发现，稻米盐溶蛋白中的ɑ-球蛋白组分经口服喂养，能显著降低小鼠血清中的胆固醇、磷脂和甘油的水平，改善高胆固醇饮食和ApoE^-/-（载脂蛋白E基因敲除）小鼠的动脉粥样硬化病变(Tong L T，Fujimoto Y，Shimizu N，et al．Riceɑ-globulin decreases serum cholesterol concentrations in rats fed a hypercholesterolemic diet and ameliorates atherosclerotic lesions in apolipoprotein E-deficient mice[J]．Food Chemistry，2012，132(1)：194–200)。而稻米中的20kD盐溶性蛋白组分被发现是具有枯草杆菌蛋白酶/ɑ-淀粉酶抑制剂活性的双功能蛋白（Othsubo K I&Richardson M，The amino acid sequence of a20kDa bifunctional subtilisin/ɑ-amylase inhibitor from brain of rice(Oryza sativa L.)seeds.FEBS 1992,309(1):68-72)。由于几乎所有具有枯草杆菌蛋白酶/ɑ-淀粉酶抑制剂活性的双功能蛋白能强烈抑制细菌枯草杆菌蛋白酶家族的丝氨酸蛋白酶，而对哺乳动物胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶的活性没有抑制作用，这些蛋白在植物中可能用于防御微生物病害(YAMASAKI T,DEGUCHI M,FUJIMOTO T,et al.Rice bifunctionalɑ-amylase/subtilisin inhibitor:cloning and characterization of the recombinant inhibitor expressed in Escherichia coli.Biosci.Biotechnol.Biochem,2006:70(5):1200-1209）。已有研究证实植物的ɑ-淀粉酶抑制剂可作为淀粉阻滞剂而延缓人体对食物淀粉的消化，降低血糖指数，能使正常人和糖尿病患者餐后血浆血糖峰值和胰岛素水平显著延缓并降低，具有显著的降血糖治疗效果和减肥效果（LAYER P,Rizza R,Zinsmeister A R,et al.Effect of a Purified Amylase Inhibitor on Carbohydrate Tolerance in Normal Subjects and Patients With Diabetes Mellitus.Mayo Clinic Proceedings,1986,61(6):442-447;Barrett M L and Udani J K.A proprietary alpha-amylase inhibitor from white bean(Phaseous vulgaris):A review of clinical studies on weight loss and glycemic control.NUTRITIONAL JOURNAL,2011,10:24)。稻米20kD盐溶性蛋白能抑制动物（红色面粉甲虫）的ɑ-淀粉酶活性（Othsubo K I&Richardson M，The amino acid sequence of a20kDa bifunctional subtilisin/ɑ-amylase inhibitor from brain of rice(Oryza sativa L.)seeds.FEBS1992,309(1):68-72)，可能通过抑制体内α-淀粉酶的活性从而降低或延缓食物中淀粉的消化速率，从而具有降血糖和降低淀粉食物血糖指数的保健功效。